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pcr产物一开始条带比较亮，后来再做就暗了，刚刚还出现了新产物？ 已有2人参与
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marker2000，目的基因1100bp，引物是师姐帮忙设计的，CG含量比较低Tm50也比较低所以特异性不高，但是跑出来了如图一，送检后说有套峰师姐让我做连接转化看看，但是后来再跑同样的pcr那个条带就暗了如图二，刚刚又跑了个40-50°c梯度的pcr(图三)，结果还出了新的产物。 图三标记出的和我第一次跑的退火温度基本上一致48.2度，第一条条带没有最开始亮但位置大致是一样的，但500左右很亮。刚刚接触分子生物实验..还请指教    发自小木虫Android客户端 |
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sky蒲公英
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【答案】应助回帖
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-12-21 07:38:36
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-12-21 07:38:36
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有二聚体，建议退火温度可以稍高一些，可以减少非特异行，另外延伸时间可以增加些，模板量可以适当加大。 发自小木虫Android客户端 |
7楼2016-12-20 23:25:25
guishuai_tj
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2楼2016-12-20 20:42:08
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guishuai_tj
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4楼2016-12-20 22:40:41