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pcr产物一开始条带比较亮,后来再做就暗了,刚刚还出现了新产物? 已有2人参与
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marker2000,目的基因1100bp,引物是师姐帮忙设计的,CG含量比较低Tm50也比较低所以特异性不高,但是跑出来了如图一,送检后说有套峰师姐让我做连接转化看看,但是后来再跑同样的pcr那个条带就暗了如图二,刚刚又跑了个40-50°c梯度的pcr(图三),结果还出了新的产物。 图三标记出的和我第一次跑的退火温度基本上一致48.2度,第一条条带没有最开始亮但位置大致是一样的,但500左右很亮。刚刚接触分子生物实验..还请指教 发自小木虫Android客户端 |
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2楼2016-12-20 20:42:08
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guishuai_tj
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往生花
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有二聚体,建议退火温度可以稍高一些,可以减少非特异行,另外延伸时间可以增加些,模板量可以适当加大。 发自小木虫Android客户端 |

7楼2016-12-20 23:25:25
8楼2016-12-28 15:13:55
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yangxp2006
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