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1007251466

新虫 (初入文坛)

[求助] 目的基因截短后变原长

我在用PCR截短一段序列之后,胶回收,连18T,转化,提取质粒以后酶切,鉴定发现酶切以后的是原长,而不是截短型的。这是怎么回事,我个人认为PCR不会错。希望大家给点建议

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sss2172014

木虫 (小有名气)

首先,连接之前的胶回收,条带大小是不是截断都对应大小的。这个确定的话,你这个就是小概率事件了,哪一步污染了原质粒。多挑几个试试看。

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2楼2016-12-18 10:47:04
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