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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » DNA跑琼脂糖胶总是跑歪拜托大神看看怎么回事？
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xieweijia33

新虫 (初入文坛)

[求助] DNA跑琼脂糖胶总是跑歪拜托大神看看怎么回事？ 已有1人参与

跑出来两边比中间快，成了倒过来的弧形。
电压从100V降低到50V，胶沸腾三次，buffer从新配过，情况有所缓解但是还是有点歪：胶两边还是跑得比中间几条道快，marker跑得尤其快。
请问到底是为什么呢？是不是电泳槽的问题？

DNA跑琼脂糖胶总是跑歪拜托大神看看怎么回事？
2016-12-13 gel with annotations.jpg
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1楼 2016-12-13 11:52:28
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wsywxs

木虫 (正式写手)
感觉像是浓度的问题，好像胶没混匀。这是多大浓度的胶？

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2楼2016-12-13 12:27:06
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六六六六六

新虫 (小有名气)
感觉是电泳槽的问题

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3楼2016-12-13 14:14:28
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sky蒲公英

版主 (文坛精英)

优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
xieweijia33: 金币+5, ★有帮助 2016-12-14 08:56:59
缓冲液最好换用新的，凝胶时间稍微长一点，点样的时候不要戳到孔上。电泳槽如果还有其他的，可以做对照。

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知识就像蒲公英的花儿一样，播种在世界的每一个角落。
4楼2016-12-14 00:02:11
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xieweijia33

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wsywxs at 2016-12-13 12:27:06
感觉像是浓度的问题，好像胶没混匀。这是多大浓度的胶？

2%的胶。问了同事说用2%的胶也有这样的问题。我已经特别注意地混匀了，沸腾了3次，再沸腾怕水分蒸发浓度变高了
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5楼2016-12-14 08:43:10
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xieweijia33

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by sky蒲公英 at 2016-12-14 00:02:11
缓冲液最好换用新的，凝胶时间稍微长一点，点样的时候不要戳到孔上。电泳槽如果还有其他的，可以做对照。

缓冲液也换了新的，点样的时候也肯定没戳到孔上。我试试把凝胶时间增加到1个小时。如果还不行就是电泳槽的问题了，但是用0.8%的胶的同事说没有出现这种问题。
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6楼2016-12-14 08:45:02
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wsywxs

木虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by xieweijia33 at 2016-12-14 08:43:10
2%的胶。问了同事说用2%的胶也有这样的问题。我已经特别注意地混匀了，沸腾了3次，再沸腾怕水分蒸发浓度变高了...

那只能换个人试试，实验就是这么怪，自己怎么都做不好，当局者迷……

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7楼2016-12-14 15:32:43
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