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jiami

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于荧光PCR提高探针特异性的问题

关于附件中文件的FAM通道曲线,我有如下几个问题求教:
  
    1. 所有FAM曲线的开始部分有一个奇怪的翘起现象,即荧光信号有一个下降的阶段,这可能是由于什么原因造成,是探针降解吗?

    2. 为什么第七列的FAM曲线(阴性样本)呈现一个凹型?理论上该样孔为阴性样本样孔,曲线应该为一条平缓的直线。

    NED曲线为GAPDH基因,作为对照,结果较为正常。引物浓度与探针浓度均为200nM。
  
    FAM曲线为检测基因,只有部分人携带。引物浓度为500nM,探针浓缩为300nM。

    仪器为7500。

   希望有经验的虫友帮帮忙这是我所有的金币了

关于荧光PCR提高探针特异性的问题
阴性样本.jpg


关于荧光PCR提高探针特异性的问题-1
阳性样本.jpg
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