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筛选内参基因,荧光定量不太会做
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菜鸟茜茜
新虫
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专业: 生物物理、生物化学与分子
[
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筛选内参基因,荧光定量不太会做
已有1人参与
我现在在做内参基因的筛选,目前只选出6个,老师让我现在先做做看荧光定量,做一个处理。我想问下大家是怎么加样的呢,我是6个内参4个重复,还有基因的3个浓度,刚刚是72孔,我同学说最好做空白对照?我也不懂,我是大菜鸟啊,很多都不懂。老师还让我可以先做内参的特异性检测,不懂这个要怎么做,请问大家有知道的吗?有在做内参筛选的同学吗?万分感谢!
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1楼
2016-12-12 00:08:10
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Orange16
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专业: 植物生理与生化
引用回帖:
6楼
:
Originally posted by
p君少年
at 2016-12-28 14:35:02
引物特异性检测就是看溶解曲线是否为单峰。
建议楼主可以先做个模板曲线,模板10倍梯度稀释,5个梯度,程序设置时选择做标准曲线,这样软件可以自动帮你算出扩增效率及R方,也能分析溶解曲线。
另外第一 ...
请问你有没有用过RefFinder这个网站筛选内参基因?别人推荐这个软件,但是文献里边的链接都不能用,也搜不出来
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7楼
2017-05-11 21:30:49
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qianxin44
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虫号: 3221962
注册: 2014-05-20
特异性检测好像是看它的溶解曲线是不是单峰
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2楼
2016-12-17 17:19:46
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zhaojieyumm
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帖子: 477
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虫号: 4537034
注册: 2016-03-24
性别:
MM
专业: 生物物理、生物化学与分子
先做内参基因看看,加溶解曲线看看引物特异性好不好
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3楼
2016-12-17 17:34:18
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虫号: 1934787
注册: 2012-08-12
专业: 病原真菌学
先验证引物的特异性 扩增效率 溶解曲线 没问题的话基本就是三个软件的事了
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4楼
2016-12-17 18:20:05
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