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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 将目的基因导入载体，表达出的蛋白都没活性
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铁虫 (小有名气)

[求助] 将目的基因导入载体，表达出的蛋白都没活性 已有3人参与

换了两个载体了表达出的蛋白都没活性咋办？

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1楼 2016-12-11 02:51:27
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ganchao1776

至尊木虫 (职业作家)
可溶还是包函体？

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2楼2016-12-11 07:54:25
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yuy111

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
It is complicated in renaturing induced purified protein. Can you provide more details and see if I can find any solutions?
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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

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3楼2016-12-11 09:14:45
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铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ganchao1776 at 2016-12-11 07:54:25
可溶还是包函体？

可溶啊

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4楼2016-12-11 10:14:30
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六六六六六

新虫 (小有名气)
换别的表达宿主系统

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5楼2016-12-11 13:55:06
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铁虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by yuy111 at 2016-12-11 09:14:45
It is complicated in renaturing induced purified protein. Can you provide more details and see if I can find any solutions?

用了两个载体pet 32a和puc15b第一个载体可溶，换了另一个行成了包涵体，改变条件之后又部分可溶，用的亲和层析镍离子柱，咪唑基溶液冲洗脱的

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6楼2016-12-11 14:30:38
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铁虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 六六六六六 at 2016-12-11 13:55:06
换别的表达宿主系统

等等吧bu知道啥原因

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7楼2016-12-11 14:31:37
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WilliamHJ

金虫 (小有名气)
你表达的是什么蛋白？基因是怎么得到和处理的，有可能从这一环节就出问题了也说不定，所以还是说的详细些

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学习中
8楼2016-12-11 14:44:16
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铁虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by WilliamHJ at 2016-12-11 14:44:16
你表达的是什么蛋白？基因是怎么得到和处理的，有可能从这一环节就出问题了也说不定，所以还是说的详细些

目的基因是找公司全序列合成的，序列测的都是对的，老师给的让我提这个蛋白，但是我怀疑他这个合成的序列是不是表达的蛋白就是没有活性的，我再换个表达系统试试，不行我就不知道怎么办了。

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9楼2016-12-11 17:01:53
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六六六六六

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
7楼: Originally posted by www.. at 2016-12-11 14:31:37
等等吧bu知道啥原因
...

看你的基因来源是什么，分析一下

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10楼2016-12-11 17:56:51
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