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mochenmi

铜虫 (小有名气)

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[求助] 荧光定量PCR溶解曲线疑虑

初次做荧光定量pcr，用的是SYBR染料。机器bio-rad CFX96，可以自动生成溶解曲线。有几处不懂的地方：
1. 先单说最高峰值，不考虑单双峰问题。图1，图2的曲线最高峰值（加粗选中的那条曲线）才刚过横线一点，这样的引物可以用嘛？
2. 像图2那样，在最高峰值前的曲线处于一个逐步上升的趋势，但是没有出现双峰，这样的引物可以用嘛？我知道图1的肯定是双峰了。。。
3. 在图中发现70℃的时候曲线出现下降，70-80℃有略微回升，比如图3。这是正常现象还是可能像问题2描述的一样？
请大神们回答疑虑，谢谢！

图1.png

图2.png

图3.png

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1楼 2016-12-09 10:01:48

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