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guoshuyuan

铁虫 (小有名气)

[求助] 有一个质粒不知道载体,只知道目的基因,我怎么才能知道用的什么载体呢? 已有2人参与

分子小白,刚拿到一个质粒,人家不记得载体了,我只知道基因是人的,我怎么知道这是什么载体呢?

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sky蒲公英

版主 (文坛精英)

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【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可以转化培养后,菌液送去测序,用通用引物测就行。

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知识就像蒲公英的花儿一样,播种在世界的每一个角落。
2楼2016-12-08 23:42:10
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guoshuyuan

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by sky蒲公英 at 2016-12-08 23:42:10
可以转化培养后,菌液送去测序,用通用引物测就行。

通用引物不是有很多,我该怎么很测序公司说?

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3楼2016-12-08 23:44:49
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sky蒲公英

版主 (文坛精英)

优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by guoshuyuan at 2016-12-08 23:44:49
通用引物不是有很多,我该怎么很测序公司说?
...

可以先跑电泳,看一下大概有多大,筛选出一些质粒。载体都能忘记!不行的话就自己重新构建载体,设计引物,从这个质粒上扩你的基因。

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» 本帖已获得的红花(最新10朵)

知识就像蒲公英的花儿一样,播种在世界的每一个角落。
4楼2016-12-09 00:00:00
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guoshuyuan

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by sky蒲公英 at 2016-12-09 00:00:00
可以先跑电泳,看一下大概有多大,筛选出一些质粒。载体都能忘记!不行的话就自己重新构建载体,设计引物,从这个质粒上扩你的基因。
...

恩,我设计了引物,菌液也有的,明天问问看公司怎么说吧,能不能测出来~~~
测序后能知道克隆选择的酶切位点吗?

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5楼2016-12-09 00:13:31
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一片云3

新虫 (小有名气)

基因靠近一段设引物,往两头测,结果和目的基因比对,多余的序列就是载体的了,然后NCBI比对,出很多载体啊标签啊之类的,让你那提供者看又熟悉的没,不行让公司测通吧

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» 本帖已获得的红花(最新10朵)

6楼2016-12-09 00:53:34
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781055707

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你用目的基因的引物去测序,测完目的基因后,让他在多测一些。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

采菊东篱下,悠然见南山。
7楼2016-12-09 07:59:56
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guoshuyuan

铁虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
7楼: Originally posted by 781055707 at 2016-12-09 07:59:56
你用目的基因的引物去测序,测完目的基因后,让他在多测一些。

好的,谢谢

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8楼2016-12-09 10:02:15
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guoshuyuan

铁虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by 一片云3 at 2016-12-09 00:53:34
基因靠近一段设引物,往两头测,结果和目的基因比对,多余的序列就是载体的了,然后NCBI比对,出很多载体啊标签啊之类的,让你那提供者看又熟悉的没,不行让公司测通吧
...

好的,谢谢

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9楼2016-12-09 10:02:29
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guoshuyuan

铁虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by sky蒲公英 at 2016-12-09 00:00:00
可以先跑电泳,看一下大概有多大,筛选出一些质粒。载体都能忘记!不行的话就自己重新构建载体,设计引物,从这个质粒上扩你的基因。
...

好的,感谢

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10楼2016-12-09 10:02:47
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