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晒太阳的小木

铜虫 (初入文坛)

[交流] 菌液PCR

最近在做菌液PCR ,大肠杆菌的鉴定,阳性用的是提取的DNA ,样品模板直接用98度处理过的菌液,25体系,1ul的模板,阳性有条带出现,样品死活p不出来(已知有两个样品提的基因组能p出来)

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sky蒲公英

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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-12-10 09:01:43
是否浓度过大啊,其实不用98度处理,pcr时把预变性温度设为98度10min就行。你可以做菌落pcr试试,蘸一点就行,模板太多扩不出来的。

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知识就像蒲公英的花儿一样,播种在世界的每一个角落。
2楼2016-12-08 09:47:33
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晒太阳的小木

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by sky蒲公英 at 2016-12-08 09:47:33
是否浓度过大啊,其实不用98度处理,pcr时把预变性温度设为98度10min就行。你可以做菌落pcr试试,蘸一点就行,模板太多扩不出来的。

好的,因为我做的菌种是保种过得,直接做菌液的会方便很多

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3楼2016-12-08 10:05:41
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zuiaixuexi

至尊木虫 (文坛精英)

祝 好 !
至乐之声唯孝悌,美羹有味是诗书。
4楼2016-12-08 10:39:33
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
菌液PCR,95℃ 1 min处理绰绰有余。
5楼2016-12-08 11:18:56
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letwin

金虫 (小有名气)


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请问,你们的大肠杆菌菌源,是购买的还是自己分离培养?
6楼2016-12-09 16:03:19
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晒太阳的小木

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by letwin at 2016-12-09 16:03:19
请问,你们的大肠杆菌菌源,是购买的还是自己分离培养?

阳性对照是买来的

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7楼2016-12-10 08:17:02
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