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晒太阳的小木

铜虫 (初入文坛)

[交流] 菌液PCR

最近在做菌液PCR ，大肠杆菌的鉴定，阳性用的是提取的DNA ，样品模板直接用98度处理过的菌液，25体系，1ul的模板，阳性有条带出现，样品死活p不出来（已知有两个样品提的基因组能p出来）

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1楼 2016-12-08 09:23:16
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sky蒲公英

版主 (文坛精英)

优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-12-10 09:01:43
是否浓度过大啊，其实不用98度处理，pcr时把预变性温度设为98度10min就行。你可以做菌落pcr试试，蘸一点就行，模板太多扩不出来的。

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知识就像蒲公英的花儿一样，播种在世界的每一个角落。
2楼2016-12-08 09:47:33
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晒太阳的小木

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by sky蒲公英 at 2016-12-08 09:47:33
是否浓度过大啊，其实不用98度处理，pcr时把预变性温度设为98度10min就行。你可以做菌落pcr试试，蘸一点就行，模板太多扩不出来的。

好的，因为我做的菌种是保种过得，直接做菌液的会方便很多

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3楼2016-12-08 10:05:41
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zuiaixuexi

至尊木虫 (文坛精英)
祝 好 ！
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至乐之声唯孝悌，美羹有味是诗书。
4楼2016-12-08 10:39:33
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
菌液PCR，95℃ 1 min处理绰绰有余。
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5楼2016-12-08 11:18:56
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letwin

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
请问，你们的大肠杆菌菌源，是购买的还是自己分离培养？
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6楼2016-12-09 16:03:19
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晒太阳的小木

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by letwin at 2016-12-09 16:03:19
请问，你们的大肠杆菌菌源，是购买的还是自己分离培养？

阳性对照是买来的

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7楼2016-12-10 08:17:02
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