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xialinfzdx

金虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】PCR引物设计

刚进实验室,第一次做PCR ,要扩个2kb左右的,用于寻找启动子。对于这种长片段的引物设计有什么要求没?有什么特别要注意的地方没?这种长片段的设计有特殊软件没?我现在在用oligo设计。
还有就是这种长片段PCR时有什么特别注意事项没?请高手指点一下。谢谢

请前辈们多多指教!
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

2kb不算长,照常设计即可
真正的长片段,就要设计长引物,提高特异性
3楼2008-12-06 21:50:16
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gwen6356

铁虫 (小有名气)

多看看相关的文献,这是我们老师总说的一句话
2楼2008-12-06 21:48:23
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cynjau

金虫 (小有名气)

primer比较好用的,2000不大啊
按正常的要求设计,要想提高特异性可以适当加长,提高退火温度都是可以的
4楼2008-12-07 15:52:16
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xiaoyadxy

金虫 (小有名气)

推荐用primer来设计, 可以用oligo评价一下
2kb不是很长,按正常的要求设计就行。
5楼2008-12-07 22:19:09
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