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三十逸翁

新虫 (初入文坛)

[求助] 引物电泳出现多条条带,求指导!!! 已有1人参与

各位虫友,下图是我对从金为智购买的引物进行的电泳结果,上样浓度是 10uM,4ul,采用14%变性PAGE电泳2.5h

请问为什么有些泳道会出现多条条带啊,我刚买的引物啊,而且选的是PAGE纯化

PS:除了最后两条,引物的长度均为50nt

http://引物电泳出现多条条带,求指导!!![/img]
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slow down to speed up
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太子参

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-12-04 05:12:22
可能引物纯度不够,不知道你是否用该引物PCR反应过,还可能是引物的特异性不好。
2楼2016-12-03 23:25:10
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wsywxs

木虫 (正式写手)


xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-12-04 05:12:28
非特异性扩增比较多,可提高退火温度,或者适当减少循环次数重新p。你这结果可以根据扩增片段长度,借助maker简单读取。如果严重干扰分型读取,建议重新设计新的引物。祝好!

发自小木虫Android客户端
3楼2016-12-04 01:13:29
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