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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 定点突变
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jcstone1027

铁杆木虫 (正式写手)

木虫

[交流] 定点突变 已有1人参与

我想做基因定点突变，DPN1法，就是用两条突变引物扩增重组质粒时，因为酶的保真性问题，可能导致质粒其他部位出现差错，特别是对于大的表达载体，有点不敢这样做，大家觉得会不会有这样的问题发生呢？

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1楼 2016-11-24 18:43:18
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starseacow

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用高保真酶，结果测序，没啥问题，很简单的实验。
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2楼2016-11-24 18:46:18
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jcstone1027

铁杆木虫 (正式写手)

木虫
引用回帖:
2楼: Originally posted by starseacow at 2016-11-24 18:46:18
用高保真酶，结果测序，没啥问题，很简单的实验。

比如我扩增10k的质粒，用pyrobest这个酶能够绝对保证扩增产物完全正确吗？

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学习，交流
3楼2016-11-24 18:56:10
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starseacow

专家顾问 (职业作家)
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by jcstone1027 at 2016-11-24 18:56:10
比如我扩增10k的质粒，用pyrobest这个酶能够绝对保证扩增产物完全正确吗？
...

试试看呗，我用KOD
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4楼2016-11-24 20:17:09
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