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jcstone1027

铁杆木虫 (正式写手)

木虫

[交流] 定点突变 已有1人参与

我想做基因定点突变,DPN1法,就是用两条突变引物扩增重组质粒时,因为酶的保真性问题,可能导致质粒其他部位出现差错,特别是对于大的表达载体,有点不敢这样做,大家觉得会不会有这样的问题发生呢?

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starseacow

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用高保真酶,结果测序,没啥问题,很简单的实验。
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2楼2016-11-24 18:46:18
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jcstone1027

铁杆木虫 (正式写手)

木虫

引用回帖:
2楼: Originally posted by starseacow at 2016-11-24 18:46:18
用高保真酶,结果测序,没啥问题,很简单的实验。

比如我扩增10k的质粒,用pyrobest这个酶能够绝对保证扩增产物完全正确吗?

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3楼2016-11-24 18:56:10
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引用回帖:
3楼: Originally posted by jcstone1027 at 2016-11-24 18:56:10
比如我扩增10k的质粒,用pyrobest这个酶能够绝对保证扩增产物完全正确吗?
...

试试看呗,我用KOD
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4楼2016-11-24 20:17:09
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