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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 普通PCR一个星期之前每次扩都能扩出来，一个星期之后同样的体系却只有引物二聚体
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Hauber

新虫 (初入文坛)

[交流] 普通PCR一个星期之前每次扩都能扩出来，一个星期之后同样的体系却只有引物二聚体

现在也过了一个星期了，引物也重新合成了，重新扩了好多次就是没有目的条带，只有引物二聚体。同样的体系，酶，模板，温度现在死活是扩不出来。但是用其他的引物，其他条件都一样，就可以扩出来
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1楼 2016-11-20 20:06:11
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迷路人啊

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
其他的引物是什么意思啊？

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2楼2016-11-20 20:39:34
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Hauber

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 迷路人啊 at 2016-11-20 20:39:34
其他的引物是什么意思啊？

就是跟我的引物不一样的引物，同一个模板。在那个不一样的引物5‘端加了几十个碱基然后设计出来的引物就是我现在用的引物。
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3楼2016-11-20 21:56:38
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幸福宝宝宝宝

新虫 (正式写手)
模板有没有问题，是不是降解了

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4楼2016-11-20 21:58:29
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Hauber

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 幸福宝宝宝宝 at 2016-11-20 21:58:29
模板有没有问题，是不是降解了

模板没有问题，其他引物都可以扩出来，说明模板是没问题的

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5楼2016-11-21 16:55:54
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susannaan

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引物不一样了，退火温度也会变吧，做个梯度试试

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6楼2016-11-22 01:31:35
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