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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 3'RACE的1p结果条带弥散！（有图~求帮忙）
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JZ9630

新虫 (初入文坛)

[求助] 3'RACE的1p结果条带弥散！（有图~求帮忙） 已有1人参与

用的是Adaptor和3‘GSP-1做的3'-outer PCR，退火温度54℃，但是电泳检测条带弥散。想请教一下：是重新设计引物再p呢？还是接着做3'inner PCR?还有，听说3'rcae可以不用巢式pcr，那要怎么做啊？谢谢大家了

3'RACE的1p结果条带弥散！（有图~求帮忙）
3'race-1p结果.jpg
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1楼 2016-11-19 10:18:23
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zjsy_xff

新虫 (初入文坛)
★
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖 2016-11-20 12:17:27
第一轮好像温度有点低。我这边第一轮弥散，第二轮取第一轮产物不稀释直接p，第二轮拿到了单一条带。测序结果正确。

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3楼2016-11-20 10:16:39
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jinnini125

木虫 (小有名气)
★
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖 2016-11-20 12:17:21
我做5端的race也是这样，第一轮弥散，巢式还是弥散，，，目前还没做出来

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2楼2016-11-20 09:59:07
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rodickholm

木虫 (正式写手)
★
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖 2016-11-20 12:17:35
稀1000倍做nest

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4楼2016-11-20 10:44:28
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
以我的经验，引物设计很重要的

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5楼2016-11-20 22:47:18
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