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JZ9630

新虫 (初入文坛)


[求助] 3'RACE的1p结果条带弥散!(有图~求帮忙) 已有1人参与

用的是Adaptor和3‘GSP-1做的3'-outer PCR,退火温度54℃,但是电泳检测条带弥散。想请教一下:是重新设计引物再p呢?还是接着做3'inner PCR?还有,听说3'rcae可以不用巢式pcr,那要怎么做啊?谢谢大家了

3'RACE的1p结果条带弥散!(有图~求帮忙)
3'race-1p结果.jpg
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jinnini125

木虫 (小有名气)


xn8008: 金币+1, 欢迎发帖 2016-11-20 12:17:21
我做5端的race也是这样,第一轮弥散,巢式还是弥散,,,目前还没做出来

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2楼2016-11-20 09:59:07
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zjsy_xff

新虫 (初入文坛)


xn8008: 金币+1, 欢迎发帖 2016-11-20 12:17:27
第一轮好像温度有点低。我这边第一轮弥散,第二轮取第一轮产物不稀释直接p,第二轮拿到了单一条带。测序结果正确。

发自小木虫IOS客户端
3楼2016-11-20 10:16:39
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rodickholm

木虫 (正式写手)


xn8008: 金币+1, 欢迎发帖 2016-11-20 12:17:35
4楼2016-11-20 10:44:28
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
以我的经验,引物设计很重要的

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5楼2016-11-20 22:47:18
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Hey Daring

新虫 (正式写手)

楼主,做的怎么样了,求深入交流下,跪求

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6楼2017-05-26 17:58:36
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