24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 1433  |  回复: 15
当前主题已经存档。

spiderboy

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
楼主,PBI121的载体,我用过,很大14K,不好做。。
首先要保证你的片段能够扩出来,然后切胶回收你的片段。出现引物二聚体的话,你可以尝试降低退火温度,或用TOUCHDOWN PCR来扩片段。
然后把回收的片段做平连或者做TA连接。
然后做亚克隆,把你的片段从平连的载体或T载体上切下来,连到PBI121上,这个时候片段和载体的摩尔比最好是10比1以上。。
你可以把详细的情况说下,我可以帮你重新设计下试验
11楼2009-08-30 09:50:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

381466632

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
还是要摸条件的,有点耐心呀。祝你成功
12楼2009-09-03 11:23:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tangtl

木虫 (正式写手)

小木虫潜水者

告诉你个笨办法。你弄多点产物。然后乙醇沉淀后再来用。(目的:提高目的片段的量)
13楼2009-09-03 13:16:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bioxixi

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
片段600多应该不难连的
首先PCR,产物胶回收后酶切,然后再回收,注意跑胶看看回收效果,连接后转化扩大培养后提质粒,做电泳和酶切鉴定
不是连接后直接跑胶,载体和片段浓度是有一定比例的 怎么判断连接效果啊
14楼2009-09-03 15:42:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tonme

禁言 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

15楼2009-09-15 12:11:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tangtl

木虫 (正式写手)

小木虫潜水者

提高目的片段浓度。。就用乙醇沉淀!
16楼2009-09-15 12:29:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 tonme 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 297,工科调剂? +10 河南农业大学-能 2026-04-14 10/500 2026-04-15 21:50 by noqvsozv
[考研] 恳请有学校收留 +5 柯淮然 2026-04-12 5/250 2026-04-15 21:49 by noqvsozv
[考研] 一志愿沪9,326求生物学调剂 +10 刘墨墨 2026-04-13 10/500 2026-04-14 15:16 by zs92450
[考研] 297求调剂 +23 ORCHID1 2026-04-10 26/1300 2026-04-14 13:52 by 陈皮皮
[考研] 105500药学求调剂 +4 x_skys 2026-04-12 4/200 2026-04-14 13:37 by rndfc
[考研] 085600材料与化工349分求调剂 +16 李木子啊哈哈 2026-04-12 17/850 2026-04-14 09:11 by fenglj492
[考研] 求调剂 +12 璃茉一定上岸 2026-04-10 13/650 2026-04-14 00:08 by Equinoxhua
[考研] 材料复试求调剂 +24 xhhdjdjsjks 2026-04-09 24/1200 2026-04-13 15:49 by 幸免 ..
[考研] 一志愿鲁东大学071000生物学学硕初试分数276求调剂 +8 慕绝cc 2026-04-09 8/400 2026-04-13 14:08 by 张zhihao
[考研] 材料考研调剂 +29 云木达达 2026-04-11 31/1550 2026-04-13 13:32 by lyh鲁老师
[考研] 290求调剂 +18 柯淮然 2026-04-12 20/1000 2026-04-13 12:56 by cyh—315
[考研] 求调剂 +16 张番茄不炒蛋 2026-04-10 17/850 2026-04-12 13:58 by 熬夜成!
[考研] 296求调剂 +14 汪!?! 2026-04-10 16/800 2026-04-12 10:48 by zhouyuwinner
[考研] 调剂 +10 只叙离别辞 2026-04-09 12/600 2026-04-11 20:57 by 逆水乘风
[考研] 调剂 +5 文道星台 2026-04-11 5/250 2026-04-11 15:01 by 凯凯要变帅
[考研] 296求调剂 +6 汪!?! 2026-04-09 6/300 2026-04-11 11:25 by zhq0425
[考研] 0854调剂 +5 音像店听花鼓戏 2026-04-10 5/250 2026-04-11 10:49 by qingpingzhu
[考研] 301求调剂 +5 149. 2026-04-10 5/250 2026-04-10 15:45 by 柴小白
[考研] 一志愿华东师范生物学326分,求调剂 +8 刘墨墨 2026-04-09 8/400 2026-04-10 12:00 by pengliang8036
[考研] 083200 初试305分 求调剂 暂不考虑跨专业 +15 Claireyyyy 2026-04-09 15/750 2026-04-09 16:11 by zhuimr
信息提示
请填处理意见