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我想做4个片段之间的融合，求高手指点 已有3人参与
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我想做4个片段之间的融合，依据融合PCR设计四对引物，现在已经将4个片段扩增出来了，第一次将两个片段进行融合，1片段400多bp，2片段200多bp，第一步将1，2片段融合PCR，发现有好几条杂带，第二步分别用1-2片段融合回收产物、1-2片段融合未回收产物与片段3等体积混合，用酶，buffer，水补足25微升，不加引物，5个循环，后加入酶，buffer，水，引物，补足50微升，后扩增30循环，发现没有目的片段 发自小木虫IOS客户端 |
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