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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 完全重复的体系，电泳结果不同
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jinnini125

木虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by zjsuiyuan at 2016-11-05 14:29:50
建议重复做一次

重做出来了，谢谢

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11楼2016-11-05 17:11:15
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朱庆平

铜虫 (小有名气)
我也经常遇到这种情况，只能说很正常，看运气喽。

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12楼2016-11-05 17:28:19
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小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我们也遇到过这种情况，体系全部配好后分装，结果有的就有，有的就p不出来
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···
13楼2016-11-05 18:43:59
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xiangyunch

金虫 (小有名气)
结果的重复性建立在实验的准确性上，你还是先把前期实验，也就是引物扩增先通过温度梯度，巢式pcr等方法保证都能扩增出来再做后续的，否则即使做出来了以后再重复依然很难

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14楼2016-11-06 19:43:08
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吗子

金虫 (小有名气)
如果除了分装其他都一样且操作没有问题的话，有可能是你加入反应物之后并没有混合好（比如引物，模板），然后就分装了。解决办法就是加完反应体系后轻轻混均，然后再分装。

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深秋
15楼2016-11-07 21:55:48
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jinnini125

木虫 (小有名气)
引用回帖:
15楼: Originally posted by 吗子 at 2016-11-07 21:55:48
如果除了分装其他都一样且操作没有问题的话，有可能是你加入反应物之后并没有混合好（比如引物，模板），然后就分装了。解决办法就是加完反应体系后轻轻混均，然后再分装。
...

谢谢

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16楼2016-11-08 14:06:40
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jinnini125

木虫 (小有名气)
引用回帖:
14楼: Originally posted by xiangyunch at 2016-11-06 19:43:08
结果的重复性建立在实验的准确性上，你还是先把前期实验，也就是引物扩增先通过温度梯度，巢式pcr等方法保证都能扩增出来再做后续的，否则即使做出来了以后再重复依然很难
...

你好，之前都是有条带的，并且切胶回收过，上图是后来又拿同样的引物扩增的，反而没有，而且出现重复样品都不一致的情况，后来重新做，除了模板全部换成新的，并且涡旋混匀离心后分装，成功回收。谢谢。

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17楼2016-11-08 14:08:46
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