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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR相关问题
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元元元儿

新虫 (小有名气)

[求助] PCR相关问题 已有2人参与

目的条带应该在780bp.可是扩出来的结果在300bp左右，这是什么原因呢

PCR相关问题


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1楼 2016-11-02 19:00:54
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bio转录组

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-11-03 05:15:34
xn8008: 应助指数+1 2016-11-03 05:15:42
1、引物不特意
2、模板问题
3、退火温度（适当提高一下）
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生活活生生累死
2楼2016-11-02 20:48:03
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小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-11-03 22:54:44
引物特异性不好，或者pcr条件不对，先优化一下条件，不行的话重新设计引物
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···
3楼2016-11-02 21:51:29
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元元元儿

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 小冀- at 2016-11-02 21:51:29
引物特异性不好，或者pcr条件不对，先优化一下条件，不行的话重新设计引物

我用的是通用引物，不知道是不是反应条件的问题，明天再试试，谢谢

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4楼2016-11-02 22:28:08
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元元元儿

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by bio转录组 at 2016-11-02 20:48:03
1、引物不特意
2、模板问题
3、退火温度（适当提高一下）

如果是模版的话是不是被降解了

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5楼2016-11-02 22:29:00
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元元元儿

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 元元元儿 at 2016-11-02 22:29:00
如果是模版的话是不是被降解了
...

如果模版有问题了，是不是应该不出条带呀

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6楼2016-11-02 22:29:30
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君恋多

新虫 (小有名气)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-11-03 22:55:04
300的条带那么亮，估计不是反应条件的问题，引物有问题的可能性比较大。

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7楼2016-11-02 23:27:19
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WilliamHJ

金虫 (小有名气)
有可能模板上有其他结合位点了，说明模板不对了

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学习中
8楼2016-11-03 22:22:34
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gaoyunzhen

铁虫 (正式写手)
如果模板是质粒的话，有可能是目的片段丢失了或者缺失了部分片段。

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9楼2016-11-04 06:35:42
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