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远方天空

铜虫 (初入文坛)

[交流] PCR问题 已有10人参与

扩400 bp左右的目的基因,前一段时间一下就扩出来了,最近怎么也扩不出来了,扩出来的片段跑胶,老在100~200bp左右有亮条带,为什么?求解,谢谢大家了。

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lichengpu

新虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可能是空气温度低,来暖气了再试试

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4楼2016-11-01 06:29:28
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张小蛋

新虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2016-11-01 22:43:04
在100-200部分有亮带,考虑是不是引物二聚体
另外,可能你的模板降解了,可以做个对照,比如可以做另外一批PCR,来验证你的纯水,dNTP,ddH2O,缓冲液,酶等是否出现污染等。
如果另一批pcr没问题,那你重新提取一下模板,再P
如果还是没有结果,那么可能就是你引物的问题了。
祝好运
9楼2016-11-01 16:05:37
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普通回帖

choujiaoqi

铁杆木虫 (知名作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
原因太多了,不知从何说起。模板?引物?换个人做试试

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2楼2016-10-31 00:19:15
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280681193

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可能是水的问题,你可以换一个新的超纯水

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3楼2016-10-31 20:02:05
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aliaaxmu2016

金虫 (职业作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可能妹子做的,来个汉子再试试
5楼2016-11-01 08:45:41
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aliaaxmu2016

金虫 (职业作家)

贴电泳图出来,不然靠猜怎么行?
6楼2016-11-01 08:46:19
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丫丫2016

银虫 (正式写手)

遨游科研世界的小鱼
7楼2016-11-01 09:15:39
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范文禄

新虫 (小有名气)

引物问题,或者材料污染

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8楼2016-11-01 15:58:28
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xrxleisure

铜虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
很可能是模板降解了,试剂、模板全换新的试试
10楼2016-11-01 17:24:14
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