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515752267

捐助贵宾 (正式写手)


我是外行,理论和精神鼓励、支持你!

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102楼2016-10-28 09:20:13
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最后一天2014

木虫 (著名写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
相应酶的适应温度和靶位是否合理?

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» 本帖已获得的红花(最新10朵)

104楼2016-10-28 09:22:28
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nn2015

金虫 (正式写手)


送红花一朵
引用回帖:
104楼: Originally posted by 最后一天2014 at 2016-10-28 09:22:28
相应酶的适应温度和靶位是否合理?

实验方案有参考过多份文献,现在就是找不到原因呀

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105楼2016-10-28 09:28:28
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nn2015

金虫 (正式写手)


引用回帖:
102楼: Originally posted by 515752267 at 2016-10-28 09:20:13
我是外行,理论和精神鼓励、支持你!

谢谢

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106楼2016-10-28 09:28:39
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nn2015

金虫 (正式写手)


引用回帖:
94楼: Originally posted by 515752267 at 2016-10-28 09:19:43
楼主能够跑出来PCR,应该懂PCR的流程和原理吧?实在不懂,再认真重做几次看效果吧~

已经重复快要吐了

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107楼2016-10-28 09:29:49
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过烟云烟

铁杆木虫 (著名写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
会不会是模板浓度太低了,加大模板量试试

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108楼2016-10-28 09:42:58
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小刷子1314

新虫 (初入文坛)


109楼2016-10-28 11:32:07
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梦旅人11407

新虫 (小有名气)


用的什么酶?
110楼2016-10-28 15:51:51
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nn2015

金虫 (正式写手)


引用回帖:
110楼: Originally posted by 梦旅人11407 at 2016-10-28 15:51:51
用的什么酶?

takara的rTaq酶。可能和酶有关?

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111楼2016-10-28 18:45:13
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论坛小虫虫

至尊木虫 (著名写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
楼主设计的引物有问题吧,是不是引物设计的太短了,或者是缺少保护碱基,或者是两条引物的退火温度相差较大,再就是PCR循环可能太少了吧

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112楼2016-10-28 19:00:01
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nn2015

金虫 (正式写手)


引用回帖:
112楼: Originally posted by 论坛小虫虫 at 2016-10-28 19:00:01
楼主设计的引物有问题吧,是不是引物设计的太短了,或者是缺少保护碱基,或者是两条引物的退火温度相差较大,再就是PCR循环可能太少了吧

两条引物退火温度差4℃左右,长度忘记是22还是24bp了。可以教一下什么是保护碱基吗?非常感谢您的回答,希望可以继续传授一些。进行过两次退火温度优化,但是都没有效果。我觉得很可能是引物的问题,又不能确定。老板要我做的这个基因在ncbi上还没有发表,近缘种的也没有,我就在一篇文献里抄了这对引物。文献里说这个也是通用引物,但是没做出结果

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113楼2016-10-28 19:45:03
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简单回复
2016-10-28 09:20   回复  
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idlely103楼
2016-10-28 09:20   回复  
nn2015(金币+1): 谢谢参与
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