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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 我的pcr到底怎么啦
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515752267

捐助贵宾 (正式写手)
我是外行，理论和精神鼓励、支持你！

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102楼2016-10-28 09:20:13
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最后一天2014

木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
相应酶的适应温度和靶位是否合理？

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nn2015
104楼2016-10-28 09:22:28
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nn2015

金虫 (正式写手)
送红花一朵
引用回帖:
104楼: Originally posted by 最后一天2014 at 2016-10-28 09:22:28
相应酶的适应温度和靶位是否合理？

实验方案有参考过多份文献，现在就是找不到原因呀

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105楼2016-10-28 09:28:28
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nn2015

金虫 (正式写手)
引用回帖:
102楼: Originally posted by 515752267 at 2016-10-28 09:20:13
我是外行，理论和精神鼓励、支持你！

谢谢

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106楼2016-10-28 09:28:39
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nn2015

金虫 (正式写手)
引用回帖:
94楼: Originally posted by 515752267 at 2016-10-28 09:19:43
楼主能够跑出来PCR，应该懂PCR的流程和原理吧？实在不懂，再认真重做几次看效果吧~

已经重复快要吐了

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107楼2016-10-28 09:29:49
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过烟云烟

铁杆木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
会不会是模板浓度太低了，加大模板量试试

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108楼2016-10-28 09:42:58
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小刷子1314

新虫 (初入文坛)
有marker吗？

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109楼2016-10-28 11:32:07
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梦旅人11407

新虫 (小有名气)
用的什么酶？
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110楼2016-10-28 15:51:51
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nn2015

金虫 (正式写手)
引用回帖:
110楼: Originally posted by 梦旅人11407 at 2016-10-28 15:51:51
用的什么酶？

takara的rTaq酶。可能和酶有关？

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111楼2016-10-28 18:45:13
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论坛小虫虫

至尊木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
楼主设计的引物有问题吧，是不是引物设计的太短了，或者是缺少保护碱基，或者是两条引物的退火温度相差较大，再就是PCR循环可能太少了吧

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112楼2016-10-28 19:00:01
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nn2015

金虫 (正式写手)
引用回帖:
112楼: Originally posted by 论坛小虫虫 at 2016-10-28 19:00:01
楼主设计的引物有问题吧，是不是引物设计的太短了，或者是缺少保护碱基，或者是两条引物的退火温度相差较大，再就是PCR循环可能太少了吧

两条引物退火温度差4℃左右，长度忘记是22还是24bp了。可以教一下什么是保护碱基吗？非常感谢您的回答，希望可以继续传授一些。进行过两次退火温度优化，但是都没有效果。我觉得很可能是引物的问题，又不能确定。老板要我做的这个基因在ncbi上还没有发表，近缘种的也没有，我就在一篇文献里抄了这对引物。文献里说这个也是通用引物，但是没做出结果

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113楼2016-10-28 19:45:03
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学海无涯洲101楼
2016-10-28 09:20   回复  
nn2015(金币+1): 谢谢参与
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idlely103楼
2016-10-28 09:20   回复  
nn2015(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫Android客户端
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