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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR每次摸条件的时候都可以跑出来，扩大体系之后跑胶就啥都没有！
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梦旅人11407

新虫 (小有名气)

[交流] PCR每次摸条件的时候都可以跑出来，扩大体系之后跑胶就啥都没有！ 已有7人参与

试了好几次都是如此，好烦躁，求大神赐教！
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1楼 2016-10-27 15:21:28
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kaobo2012

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
扩大后，具体是多少？有的PCR仪器，温控不是很好，所以，你应该明白了吧？
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2楼2016-10-27 20:33:28
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mcttm

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
终于遇到遭遇同样问题的同志了，泪流满面！
现在我都只敢用小体系pcr，每管20-25微升。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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3楼2016-10-28 01:32:42
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饺子弟

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
可能扩大后体系不如小体系均匀吧，工作量大也还是用小体系吧，最后混合呗。总比一味的重复好。

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4楼2016-10-28 06:39:32
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西北望

新虫 (正式写手)
那就别扩大

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5楼2016-10-28 07:14:50
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梦旅人11407

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 饺子弟 at 2016-10-28 06:39:32
可能扩大后体系不如小体系均匀吧，工作量大也还是用小体系吧，最后混合呗。总比一味的重复好。

扩大体系后每次都会吹匀呀。
小体系有时候跑出来特异性非常不好，条带很暗，真是心累
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6楼2016-10-28 15:57:26
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饺子弟

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
那多加步胶回收呢。你的引物是不是不太合适呢。

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7楼2016-10-28 23:08:07
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010308Jing

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-10-29 21:35:45
那就不要扩大啊，就用小体系，多几组重复，然后电泳上样的时候尽可能加在一起就行了

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8楼2016-10-29 14:59:20
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lemonvivi

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
那个PCR管最多装50ul

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9楼2016-10-29 21:19:16
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choujiaoqi

铁杆木虫 (知名作家)
体积大了，相应的时间要延长。。这是常识。。不然就多配几管

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10楼2016-11-01 00:27:22
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