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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 琼脂糖凝胶电泳总是丑，愁死个人，求助！
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jiangjinglin

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
Ivy尘: 金币+3, ★★★很有帮助, 谢谢~ 2016-10-28 20:22:14
胶没制好 看图应该没起泡 是不是跑的时候 电压没设置好
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我思故我在
31楼2016-10-28 09:39:06
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无处告别

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
32楼2016-10-28 11:28:30
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去哪里看海

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
Ivy尘: 金币+3, ★★★很有帮助 2016-10-28 20:21:58
个人感觉是有这么几种可能，胶溶的不好，就像大家说的，多热一会，必须等凝固好了再点样；电泳仪设置的电压过大或电流过大，不要着急，慢慢跑胶，还有就是电泳液是不是少了？
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33楼2016-10-28 14:50:37
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Ivy尘

新虫 (正式写手)
引用回帖:
26楼: Originally posted by luozie at 2016-10-27 23:12:38
我大概明白你出问题的原因了；1、配置琼脂糖凝胶时是agarose加入缓冲液配置的不是使用无菌水，使用无菌水会导致凝胶内部电泳是形成电压阻滞现象，电泳速度变慢；电泳变慢，同时发热增加，有可能造成凝胶融化现象； ...

我用TBE缓冲液配胶的，加无菌水是因为沸腾2min会跑掉很多水，预先补足。今天换了六一的电源和槽，上了30毫升样，好很多了~
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34楼2016-10-28 18:19:52
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Ivy尘

新虫 (正式写手)
引用回帖:
30楼: Originally posted by 寂寞之巅 at 2016-10-28 08:41:01
配胶不是用缓冲液配置吗？为啥你是用无菌水配置  胶在煮的时候  拿出来 摇一下  倒胶是的温度不要太高 不烫手的时候加入染料 再倒...

我用TBE缓冲液配胶的，加无菌水是因为沸腾2min会跑掉很多水，预先补足。现在换了六一的电源和槽，好很多了。bio rad竟然还比不上国产的。。。
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35楼2016-10-28 18:22:23
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Ivy尘

新虫 (正式写手)
问题暂时解决了~
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36楼2016-10-28 20:18:14
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Ivy尘

新虫 (正式写手)
咦，没法上图。

现在loading buffer量减少一点，每个孔少点样，控制在30-40微升，跑出来就比较平了。可能是之前点样太满。

多谢大家的指教！！！万分感激！！！
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37楼2016-10-28 20:21:35
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shanyue00

铁杆木虫 (著名写手)
制胶有问题，沸腾后使劲摇匀

发自小木虫Android客户端
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耐心说话，好好说话！
38楼2016-10-28 22:38:37
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aliaaxmu2016

金虫 (职业作家)
1.看看是不是胶的浓度不对，感觉你可以配个高浓度胶；2.胶没有融均匀，不是沸腾几次就好了，你要看看里面有没有细小的固体颗粒；

发自小木虫Android客户端
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39楼2016-10-29 22:42:23
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