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琼脂糖凝胶电泳总是丑，愁死个人，求助！ 已有8人参与
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实验做得挺久的，可是琼脂糖凝胶电泳跑得一直很丑，最近胶回收总是出丑图，位置还不准，真是受不了了，来请教！ 1.我是在loading buffer（50% 甘油，EDTA 1% 溴酚蓝，5 mM EDTA ）里加 1%Gel red ,上样时5微升Loading buffer+50毫升 PCR产物，点样孔几乎溢出。 2.BioRAD 电源、电泳槽（小），电压100V，跑半小时，溴酚蓝到胶块中间。 最近PCR产物胶回收的图，溴酚蓝带、目的条带都挤在一起了，位置根本不准，好生气。小孔点5微升位置正常。  从前正常一点的，酶切产物胶回收图，我觉得还好呢。  我自己的推测： 1. 上样量过大？loading buffer量不合适？ 2.制胶不均匀？我都是沸腾两次才倒胶的。 求助~~ |
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生物技术专业
铁虫 (小有名气)
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3楼2016-10-26 14:39:33
，应该就是制胶不均匀，溶胶时你在正常比例上多加10 ml TAE，然后溶2分钟，在旁边看着注意不要溢出。这样跑的图绝对美美哒 
4楼2016-10-26 15:26:48
5楼2016-10-26 15:38:48
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kuaile5420: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-10-27 20:45:06
kuaile5420: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-10-27 20:45:06
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稍微多放电解液，加热到澄清后加染料，赶掉气泡，点样不要太多，溢出去的话也会不好看的 发自小木虫IOS客户端 |
6楼2016-10-26 15:40:54