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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 免疫共沉淀实验咨询
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20081118129

新虫 (著名写手)
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免疫共沉淀实验咨询
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请问各位大神，有谁做过免疫共沉淀吗？本人急需求助！！！！谢谢！！！！

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1楼 2016-10-24 17:16:46
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萝卜涨价了

铜虫 (初入文坛)
免疫共沉淀的基本策略是利用抗原与抗体之间的专一性作用为基础，从而用于研究蛋白质与蛋白质之间的相互作用。随着社会的发展，免疫共沉淀技术不断完善。早期，研究人员利用凝胶电泳来分辨出免疫共沉淀蛋白，通过抗原溶液加入琼脂糖之类的可渗透基质的小孔内（基质是由生物的分子构成的无定形胶状物，无色透明，具有一定黏性，孔隙中有组织液），并在邻近小孔内加入抗血清，之后随着抗原抗体的扩散，大分子进入凝胶内，两者之间产生相互作用，形成复合物，通过抗原和抗体的扩散从而形成浓度梯度，也在最适浓度处形成多分子网络复合物，最终大分子蛋白复合物从溶液中析出。免疫共沉淀早期的改变方向是促进多聚体反应，使得免疫复合物从溶液中析出。随后，第二抗体与免疫复合物中的抗体形成网络状结构被研究人员发现并且利用，从而可以不必对每种抗原的第一抗体进行滴定实验。这种方法一直沿用至今。20世纪70年代中期，人们开始使用固相反应，利用固定在金黄色葡萄球菌表面的蛋白A吸附抗体，再与相应的抗原结合。随着科技发展，目前这方法已经改进为利用表面固定蛋白A或蛋白G的微球来分离抗原抗体复合物，以达到检测抗原或目标蛋白的目的。
免疫共沉淀原理：
免疫共沉淀是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的，是一种用于研究蛋白质相互作用的经典方法。它的基本原理是：若用蛋白质X的抗体免疫沉淀X，那么与X在体内结合的蛋白质Y也能沉淀下来。目前多用proreinA预先结合固化在琼脂糖微珠上，使之与含有抗原的溶液及抗体反应后，琼脂糖微珠上的proreinA与抗体Fc特异性结合，由于抗体抗原特异性，沉淀蛋白X；溶液中有和蛋白X相互作用的物质，就能沉淀下来。
更多免疫共沉淀实验介绍：www.detaibio.com/topics/co-ip-overview.html
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17楼2018-05-08 09:07:26
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xieyueting14楼
2016-10-24 17:17   回复  
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江南的竹6楼
2016-10-24 17:17   回复  
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ENEMY4楼
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川海羽生7楼
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c5045198692楼
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信念创始12楼
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ABC杨梅9楼
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fxs0018楼
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bijiang5楼
2016-10-24 17:17   回复  
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木木的路3楼
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mfq2113楼
2016-10-24 17:17   回复  
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yzh96248807111楼
2016-10-24 17:17   回复  
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恋海1510楼
2016-10-24 17:17   回复  
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