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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 蛋白分离纯化
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a3138673

新虫 (小有名气)

[求助] 蛋白分离纯化 已有1人参与

刚刚做分离纯化 用酶标仪测蛋白在280nm处的吸光度值。 开始用黑色酶标版 然后读数是overflow。请问是怎么回事？听说要用增益功能？具体什么原理。

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1楼 2016-10-20 21:47:18
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queen3511

铜虫 (小有名气)
你要用透明板吧。这个是测280的吸光值，是把板当做比色皿用的，要透明的啊。你黑色的不透光啊

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2楼2016-10-20 21:55:20
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a3138673

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by queen3511 at 2016-10-20 21:55:20
你要用透明板吧。这个是测280的吸光值，是把板当做比色皿用的，要透明的啊。你黑色的不透光啊

开始用的透明板 结果发现空白都有很大的数值，空白里面是缓冲液 在280nm处应该没有值。所以才换的黑色板

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3楼2016-10-20 21:57:47
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queen3511

铜虫 (小有名气)
你确定测的是吸光值，不是透光率

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4楼2016-10-20 22:31:02
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小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
3楼: Originally posted by a3138673 at 2016-10-20 21:57:47
开始用的透明板 结果发现空白都有很大的数值，空白里面是缓冲液 在280nm处应该没有值。所以才换的黑色板
...

缓冲液也会有吸收峰值的，你最后测得数据减掉空白对照就行了
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···
5楼2016-10-21 14:26:12
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514278815

木虫 (小有名气)
2楼正解

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6楼2016-10-22 15:04:30
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