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【验证电泳图很简陋】菌液PCR验证以及测序问题 已有1人参与
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样品4K的片段,插入到PMD19T载体中,制备成菌液。 菌液PCR验证出现两个条带(菌P引物为通用引物M13F(-47)和M13R(-48)),见手画图,原胶图未保存,各位大牛见谅。 1:点样孔 2:与marker比对差不多4K片段大小的条带 3:目测空载条带 4:溴酚蓝条带 4个菌液送测序,M13F(-47)和M13R(-48)测序结果全部空载,插入片段中间引物测序无信号。 将2这个4K的片段条带割胶回收送测序,M13F(-47)和M13R(-48)测序结果无信号。 请问菌P验证中出现的2号条带,差不多4K大小的是怎么回事?另两个样品3.5K和2K的菌P验证也是出现这个情况,也是有两条带,一条3.5K和空载条带,一条2K和空载条带。 菌P,验证条带,有插入片段大小的条带和空载条带同时存在,请问插入片段的条带是怎么回事?谢谢 11.png@biostar2009@飞约疯人院 |
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