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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 测序结果无信号或新号弱
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wy604987664

新虫 (小有名气)

[求助] 测序结果无信号或新号弱 已有5人参与

构建转化载体，重头做了3次，每次我自己都可以双酶切出来也可以菌液pcr出来，送测就是测不出来，换过公司也测不出来，这怎么办！！！！

@飞约疯人院 @biostar2009 发自小木虫Android客户端
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1楼 2016-10-15 18:22:25
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wy604987664

新虫 (小有名气)
★
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-10-16 08:59:19
引用回帖:
3楼: Originally posted by lemonvivi at 2016-10-15 20:27:15
是不是浓度太低

有个基因的2个上面的确写的浓度低，序列可以参考。但其他都是没信号，不同的基因跟载体都是这样

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5楼2016-10-15 22:53:25
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普通回帖

つ溪衍雨蓦ゝ

木虫 (小有名气)
★
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-10-16 08:58:54
菌液PCR能扩出来，质粒可以提出来吗？你用PCR的引物送测序也没信号？
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有人说,鸡蛋从外打破,是食物;从内打破,是生命.人生亦如此,从外打破,是压力;从内打破，是成长
2楼2016-10-15 18:46:25
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lemonvivi

新虫 (小有名气)
★
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-10-16 08:59:00
是不是浓度太低

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3楼2016-10-15 20:27:15
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小布叮咚

新虫 (小有名气)
★
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-10-16 08:59:13
菌液PCR都p出来了，测序就测不出来，测序引物送对了吗？

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happy
4楼2016-10-15 21:10:24
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wy604987664

新虫 (小有名气)
★
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-10-16 08:59:25
引用回帖:
2楼: Originally posted by つ溪衍雨蓦ゝ at 2016-10-15 18:46:25
菌液PCR能扩出来，质粒可以提出来吗？你用PCR的引物送测序也没信号？

可以提出来，我一般一次摇4ml，2ml用来提质粒酶切，2ml保菌，可以提出来并且我酶切都可以切开，就是测不出来，快奔溃了，停止进度快一个月了，卡在这

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6楼2016-10-15 22:54:58
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wy604987664

新虫 (小有名气)
xn8008: 欢迎发帖交流 2016-10-16 08:59:31
引用回帖:
4楼: Originally posted by 小布叮咚 at 2016-10-15 21:10:24
菌液PCR都p出来了，测序就测不出来，测序引物送对了吗？

肯定没问题，通用引物跟特异引物我都试了，测不出来啊啊啊啊

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7楼2016-10-15 22:55:38
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江边鸟

银虫 (小有名气)
xn8008: 欢迎发帖交流 2016-10-16 08:59:36
可能是菌液不纯，重新挑个克隆吧。或者用菌p的产物测序

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8楼2016-10-16 08:52:40
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小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可能是提的质粒的问题，你重新提，重新送去测序吧
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···
9楼2016-10-16 17:53:43
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wy604987664

新虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 江边鸟 at 2016-10-16 08:52:40
可能是菌液不纯，重新挑个克隆吧。或者用菌p的产物测序

我重新试了3次了，还是不行

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10楼2016-10-16 21:42:50
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