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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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belinda_jun

新虫 (初入文坛)

[求助] 目的片段不见了 已有2人参与

第一张图左边是用目的基因的引物菌液pcr,右边是提的质粒,第二张图是双酶切的条带,目的条带不见了,这是什么情况啊,求大神解

目的片段不见了


目的片段不见了-1


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惰惰228

银虫 (小有名气)

双酶切后的目的条带多大?如果比较小,酶切时质粒用量太低的话,可能就看不到。如果目的片段小于1000bp,建议酶切时质粒需要1ug。
好运!
原来你也在这里
2楼2016-10-17 06:37:15
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bio转录组

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可能酶切引物不特意,在载体上也有这个引物,你查一下。按理说不会不见的,或者没连上
生活活生生累死
3楼2016-10-17 07:50:10
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781055707

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
没切开,你的载体RNA污染严重,先做一次质粒的纯化或胶回收吧(用胶回收获得的质粒好些),回收后在酶切。
采菊东篱下,悠然见南山。
4楼2016-10-17 08:41:29
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弑者星魂

金虫 (正式写手)

菌落PCR的假阳性比较多,我们一直以酶切结果为准

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5楼2016-10-17 10:22:47
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Inmybloom

铜虫 (小有名气)

重复一下酶切吧,感觉引物二聚体也比较严重,blast一下引物看一看

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哈哈哈哈
6楼2016-10-17 14:24:05
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