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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 如何将破碎的DNA单链变成DNA双链？
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oylb

禁言 (正式写手)
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11楼2016-10-14 00:03:16
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双鱼座的瓶盖

金虫 (小有名气)
引用回帖:
11楼: Originally posted by oylb at 2016-10-14 00:03:16
赞十楼。同问，你如何确定是单链DNA？油中提取DNA的方法可以描述下，不然如何确定是不是假象？先确定是不是单链，再讲讲你的实验目的，根据实验目的建议恰当的实验方法
...

我是用promega quantus 测的one DNA

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12楼2016-10-14 14:54:46
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双鱼座的瓶盖

金虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 602059625 at 2016-10-13 08:37:26
PCR本来就要把模版加热解链，单链双链都能作模版
单链扔到100度的水里，让水自然冷却，就能复性成双链
...

放热水里多长时间呢

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13楼2016-10-14 15:11:43
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602059625

金虫 (知名作家)
引用回帖:
13楼: Originally posted by 双鱼座的瓶盖 at 2016-10-14 15:11:43
放热水里多长时间呢
...

等水自然冷却到室温DNA就复性了
100度时DNA变性，慢慢冷却时单链重新配对
如果降温太快就会来不及配对变成一团乱麻
生化书上不是有这个实验来测Tm

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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14楼2016-10-14 16:08:35
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双鱼座的瓶盖

金虫 (小有名气)
引用回帖:
14楼: Originally posted by 602059625 at 2016-10-14 16:08:35
等水自然冷却到室温DNA就复性了
100度时DNA变性，慢慢冷却时单链重新配对
如果降温太快就会来不及配对变成一团乱麻
生化书上不是有这个实验来测Tm
...

DNA不会降解吧

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15楼2016-10-14 16:16:49
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602059625

金虫 (知名作家)
引用回帖:
15楼: Originally posted by 双鱼座的瓶盖 at 2016-10-14 16:16:49
DNA不会降解吧
...

PCR还98度变性呢

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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16楼2016-10-14 16:43:45
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biostar2009

专家顾问 (正式写手)
引用回帖:
11楼: Originally posted by oylb at 2016-10-14 00:03:16
赞十楼。同问，你如何确定是单链DNA？油中提取DNA的方法可以描述下，不然如何确定是不是假象？先确定是不是单链，再讲讲你的实验目的，根据实验目的建议恰当的实验方法
...

他们楼已歪塌，扶不起来了。。。
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17楼2016-10-16 22:40:28
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