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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 目的基因的回收
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鱼兮☆

新虫 (正式写手)

[求助] 目的基因的回收

在挖取琼脂糖凝胶块时为什么尽量减少不含目的dna的凝胶？为什么尽量减少紫外线的照射时间

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1楼 2016-10-11 21:08:22
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Joyea2333

新虫 (初入文坛)
★
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-10-12 09:13:41
切胶回收的时候一般都会尽量少切到琼脂糖、做回收的时候要重新溶解胶块，然后逐步剔除溶液中的杂质，溶解后的琼脂糖毕竟也算一种杂志嘛，当然越少越好了、另外DNA经紫外光照射会发生一定程度的变性，DNA损伤什么的，动作快一点，少切到胶比较好。

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2楼2016-10-11 22:58:09
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鱼兮☆

新虫 (正式写手)
★
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-10-12 09:13:47
引用回帖:
2楼: Originally posted by Joyea2333 at 2016-10-11 22:58:09
切胶回收的时候一般都会尽量少切到琼脂糖、做回收的时候要重新溶解胶块，然后逐步剔除溶液中的杂质，溶解后的琼脂糖毕竟也算一种杂志嘛，当然越少越好了、另外DNA经紫外光照射会发生一定程度的变性，DNA损伤什么的， ...

谢谢！

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3楼2016-10-12 08:03:37
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Freda_0829

新虫 (初入文坛)
如果琼脂糖凝胶块过多，胶回收的时候融不干净，会导致最终dna不纯，具体表现为测浓度的时候260280比值不在正常范围，且260处峰不明显，甚至在230处有峰。紫外线照射时间过长可能导致基因突变，所以一般尽量短。

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4楼2016-10-12 22:57:19
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