应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 有关双酶切问题，求助！！！
192/2返回列表上一页12
查看: 1992  |  回复: 18
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

黄小萌萌

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
以你目的基因的引物，做个PCR验证
赞一下 回复此楼
11楼2016-10-10 16:30:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

顺利一生

新虫 (初入文坛)
确定目的条带有酶切位点，换用新的酶切buffer，酶切时间稍微加长例20分钟
赞一下 回复此楼
12楼2016-10-10 16:57:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

周义杰

新虫 (初入文坛)
可以先做两次单酶切试试

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
13楼2016-10-10 19:54:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ttszero

新虫 (小有名气)
你加了保护碱基么？

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
14楼2016-10-11 22:03:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

上官凤舞

新虫 (正式写手)
首先确定你的质粒为阳性，其次确定你的酶切体系步骤正确，最后测序鉴定

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
15楼2016-10-11 22:57:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Nolan_童

新虫 (初入文坛)
先用通用引物测序验证有目的片段，再确定酶切时间是否足够以及试剂有没有问题，然后如果你的片段太小的话比如100多bp就可能跑胶的时候看不到

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
16楼2016-10-11 23:22:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

饺子弟

铜虫 (小有名气)
首先确定你的目标片段上有此酶切位点，在此基础上看双酶切是否可以同时进行在一个酶切体系中，还是需要分步酶切；酶切的温度、酶活、环境影响也要考虑一下。希望帮到你

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
17楼2016-10-13 06:55:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

781055707

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

你用的是什么的酶，国产的吗？
赞一下 回复此楼
采菊东篱下，悠然见南山。
18楼2016-10-13 08:09:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

he-路路

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我之前也遇到过这个问题，换一下酶切体系试试
赞一下 回复此楼
.......
19楼2016-10-13 09:49:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 MIDNA 的主题更新
192/2返回列表上一页12
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 23jxep3nCNZb 2026-09-14 3/150 2026-09-16 05:51 by LH5NkK5Ud4bh
[博后之家] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-16 05:35 by LH5NkK5Ud4bh
[找工作] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-16 05:15 by LH5NkK5Ud4bh
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 5/250 2026-09-16 04:51 by LH5NkK5Ud4bh
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 4/200 2026-09-16 04:27 by DgNGHc3h5tPl
[博后之家] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 4/200 2026-09-16 04:11 by DgNGHc3h5tPl
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 5/250 2026-09-16 03:59 by DgNGHc3h5tPl
[找工作] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 3/150 2026-09-16 02:38 by DgNGHc3h5tPl
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +6 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 6/300 2026-09-16 02:02 by DgNGHc3h5tPl
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 3/150 2026-09-15 20:59 by zNcEhTcH7ihq
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 3/150 2026-09-15 20:26 by zNcEhTcH7ihq
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 3/150 2026-09-15 19:59 by CgyNCDVNhGVg
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 40ms4Wlo4umh 2026-09-14 3/150 2026-09-15 19:23 by CgyNCDVNhGVg
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 5/250 2026-09-15 16:59 by CgyNCDVNhGVg
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +6 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 7/350 2026-09-15 14:22 by VMDqgnlKimtZ
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +6 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 7/350 2026-09-15 14:13 by VMDqgnlKimtZ
[教师之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 08:14 by C79jjtjAKjEn
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 4/200 2026-09-15 08:02 by C79jjtjAKjEn
[考研] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 5/250 2026-09-14 22:25 by vZfe6xYu34yj
[基金申请] 求教各位大神：2026教育部人文社科青年基金项目何时公示呀？ +5 云宴山人 2026-09-10 7/350 2026-09-14 12:11 by ecnu2013
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭