应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 5’RACE如何确定是否延伸到头？
51/1返回列表
查看: 1981  |  回复: 3
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

machao8405

木虫 (正式写手)

[求助] 5’RACE如何确定是否延伸到头？ 已有1人参与

最近正在做RACE打算拿到一个基因的全长，3’RACE很好理解，延伸到poly-A尾巴即算是延伸到头了，那么5’RACE怎么来确定拿到的结果是否延伸彻底，我根据3’和5’结果取和同源性较高的物种进行比对，有4个基因都是5’端有或多或少的缺失，长得能有好几百bp，请教该如何判断5’端是否延伸完全
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2016-09-27 22:43:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

drwhoknowss

荣誉版主 (正式写手)
我记得有试剂盒，能在5端加个primer adapter，然后就能pcr，测序

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
Progress in science depends on new techniques, new discoveries and new ideas, probably in that order. -- Nobel laureate Sydney Brenner
4楼2017-02-17 12:54:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 4 个回答

llsllslls92

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-09-28 08:17:47
这个感觉还真没有办法确认啊 不过只要材料新鲜，且提取的RNA的质量好，做反转录后，再做RACE一般都会是延伸完全了的，应该不用担心这个问题吧。
赞一下 回复此楼
2楼2016-09-27 22:55:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

黄小燥

新虫 (初入文坛)
你好楼主，我想向你请教一下RACE的问题，希望你能指导一下！我菌种是真菌，由于我要的基因全长序列在NCBI上没有报道，所以我首先通过其他菌种的氨基酸序列比对，找到保守序列后用简并引物P出了一段序列，通过blast比对是我的目的基因片段，之后我再用类似方法一直P不出来了。而且我一直是用DNA为模板的，所以我在考虑是不是方法一开始就错了。我想请教一下，通过我现在得到的这部分序列能否得到基因全长，要用什么方法。因为是放养硕士，所以也没有人能给指导，我看了相关的文献，所以在考虑是否能用RACE来解决。
赞一下 回复此楼
3楼2017-02-17 11:14:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 4 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 听说今天filecode变了 +18 布布和一二 2026-08-06 32/1600 2026-08-07 00:37 by ywclong81
[基金申请] 基金中了 +6 laoda193707 2026-08-06 6/300 2026-08-06 23:34 by dragonxp
[基金申请] filecode +10 等待解的谜 2026-08-06 14/700 2026-08-06 21:16 by zhanghaozhu
[基金申请] 固定端突然变了，今天 +3 archvillain 2026-08-06 7/350 2026-08-06 21:05 by archvillain
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[基金申请] 大家散了吧，后缀研究没有意义，别浪费时间了，过好目前的每一天，不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 6/300 2026-08-06 20:19 by 苏知砚
[有机交流] 一个有机合成实验室都需要哪些设备？ 50+3 kf2781974 2026-07-31 12/600 2026-08-06 15:11 by eddyin
[基金申请] 求各位大神看下 100+6 hpkpkpkp 2026-08-05 33/1650 2026-08-06 14:49 by zhiyanjiang
[教师之家] 咨询面上基金 +4 李长云 2026-07-31 7/350 2026-08-06 11:20 by 李长云
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
[基金申请] 8月时间戳变的，举个手。玩一下，释放压力 +9 archvillain 2026-08-04 11/550 2026-08-05 20:06 by wlwhappy
[基金申请] 面上再次挂了，太难了，躺也躺不了，倦也卷不过，小学校之殇！ +22 低垂的野花 2026-07-31 30/1500 2026-08-05 18:03 by 低垂的野花
[基金申请] 好消息？这个有何含义？？？ +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
[考博] 【2027博士申请】纳米药物递送方向 20+3 13586093586 2026-08-03 4/200 2026-08-05 09:59 by lfy8008
[基金申请] 有没有H口的？有收到消息的吗？ +3 超级海虾 2026-08-04 3/150 2026-08-04 17:26 by 学教育滴
[论文投稿] 十年后又回来了，论文投稿求助 +3 哈哈114477 2026-08-01 3/150 2026-08-04 15:40 by tegsgjy20
[基金申请] 纯娱乐，不喜欢勿喷 +7 Tide man 2026-08-04 10/500 2026-08-04 15:10 by loufangrui
[基金申请] 面上提前没消息，有中的吗 +14 archvillain 2026-08-02 18/900 2026-08-04 14:42 by archvillain
[基金申请] 娱乐 +4 Tide man 2026-08-03 4/200 2026-08-04 11:51 by wgch518
[基金申请] 什么时候能放榜呀？ +3 Jacob678 2026-08-03 3/150 2026-08-03 16:14 by gltch
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭