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allica

新虫 (小有名气)

[交流] 求助土壤中DNA的PCR反应

小弟最近要做土壤样品中微生物群落结构分析。从土壤中提DNA然后利用细菌通用引物PCR,最后做DGGE分析。
      现在DNA提取已经完成,但在PCR反应时总P不出来。可能是腐殖酸的物质含量较高抑制了PCR反应。
       请问有没有很好的方法可以去除这些杂质将DNA纯化。用DNA纯化柱的话对DNA的多样性会有很大的损失吗???
      请大侠指教!!!!!!

[ Last edited by 350784478 on 2009-11-6 at 20:39 ]
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xiaoyadxy

金虫 (小有名气)


司马诸葛(金币+1,VIP+0):谢谢交流 8-14 21:04
在PCR体系中加入BSA,可以抑制腐殖酸。
如果还不行,建议提取总DNA时先进行脱腐殖酸,步骤也不麻烦,很多文献有报道。
2楼2008-11-23 16:51:22
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allica

新虫 (小有名气)

感谢。。。
3楼2008-11-23 17:05:11
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