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tongleaves

木虫 (正式写手)

[求助] 请问DNA杂交过程中Na和Mg的浓度分别有什么影响？ 已有1人参与

最近在做一个电极表面的HCR反应，之前试了很多次都不太成功，但更换了缓冲液后效果就好很多。区别主要是NaCl的浓度从100mM提高到了1M，开心之余还是想搞清楚，Na浓度对DNA杂交过程究竟有什么影响？为什么提高Na浓度会有助于杂交（当然也有可能是实验中其他条件的影响，但个人觉得Na浓度的可能性比较大）？Mg浓度又有什么影响呢？
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1楼 2016-09-26 11:32:58
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ChangEaton

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
tongleaves: 金币+5, ★★★很有帮助, 谢谢！ 2016-09-27 10:09:22
用来减小DNA因磷酸骨架负电引起的德拜半径，离子浓度高德拜半径小，杂交阻力小，一般Na离子50mM足够了
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2楼2016-09-26 20:39:44
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tongleaves

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ChangEaton at 2016-09-26 20:39:44
用来减小DNA因磷酸骨架负电引起的德拜半径，离子浓度高德拜半径小，杂交阻力小，一般Na离子50mM足够了

请问在电极表面进行反应，或者多条链杂交的话，是不是需要的盐浓度会大一些？
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3楼2016-09-27 10:10:46
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ChangEaton

银虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by tongleaves at 2016-09-27 10:10:46
请问在电极表面进行反应，或者多条链杂交的话，是不是需要的盐浓度会大一些？...

大点没影响，没必要太大，具体可以参考电化学检测文献。

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4楼2016-09-27 12:22:43
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碧柯

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by tongleaves at 2016-09-27 10:10:46
请问在电极表面进行反应，或者多条链杂交的话，是不是需要的盐浓度会大一些？...

请问楼主是做这个的吗，我的链60bp，三条链杂交，一直杂交不起来，都不知道怎么回事
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5楼2018-04-28 11:47:28
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雨后春笋！

银虫 (正式写手)
想问问楼主，用的是什么缓冲液？
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6楼2018-05-01 16:33:54
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ymeng1314

新虫 (初入文坛)
请问楼主这个问题解决了么  我也是有用的1M的氯化钠但背景有点高 想请教一下
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7楼2019-05-09 21:59:12
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tl糖包子

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 碧柯 at 2018-04-28 11:47:28
请问楼主是做这个的吗，我的链60bp，三条链杂交，一直杂交不起来，都不知道怎么回事...

请问你的问题解决了吗，可以讨论一下吗

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8楼2019-07-19 18:55:29
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呵呵学习123

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 碧柯 at 2018-04-28 11:47:28
请问楼主是做这个的吗，我的链60bp，三条链杂交，一直杂交不起来，都不知道怎么回事...

我发卡结构探针和目标链也是结合不上，不知道为什么？请问你怎么解决的

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9楼2019-12-04 19:27:41
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苏苏要毕业

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 呵呵学习123 at 2019-12-04 19:27:41
我发卡结构探针和目标链也是结合不上，不知道为什么？请问你怎么解决的
...

同问
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10楼2020-01-17 09:23:22
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