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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » DNA变性聚丙烯酰胺电泳问题 求助
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xincer

木虫 (小有名气)

[求助] DNA变性聚丙烯酰胺电泳问题 求助 已有5人参与

为什么我跑20%的变性PAGE胶，加DNA样本的时候都沉不到孔底，一直飘在上面。。
我用7M的尿素变性。，救助啊。

@biostar2009 @wizardfan @飞约疯人院 发自小木虫Android客户端
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1楼 2016-09-24 11:33:24
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Swift1204

新虫 (小有名气)
是单链还是双链，加饱和尿素震荡加热再上样。

发自小木虫Android客户端
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10楼2016-09-26 18:00:02
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ylma雁过无痕

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kuaile5420: 金币+2, 欢迎发帖交流 2016-09-24 21:23:34
变性PAGE胶上样之前，一般都会用200 uL的移液器吹打胶孔，将胶孔残留的尿素吹出来，然后再上样。上样用的loading buffer一般用的是6X非变性PAGE胶所用的buffer加到饱和尿素溶液中，后续按照4Xbuffer来配制DNA上样溶液
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平静地度过每个钻研学术的日子
2楼2016-09-24 16:48:18
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xincer

木虫 (小有名气)
xn8008: 欢迎发帖交流 2016-09-25 10:25:10
引用回帖:
2楼: Originally posted by ylma雁过无痕 at 2016-09-24 16:48:18
变性PAGE胶上样之前，一般都会用200 uL的移液器吹打胶孔，将胶孔残留的尿素吹出来，然后再上样。上样用的loading buffer一般用的是6X非变性PAGE胶所用的buffer加到饱和尿素溶液中，后续按照4Xbuffer来配制DNA上样溶 ...

谢谢。也就是说上样前先将6*buffer用饱和尿素溶液稀释到4*吗？

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3楼2016-09-25 00:15:22
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yuy111

银虫 (正式写手)
感谢参与，应助指数 +1
xn8008: 欢迎发帖交流 2016-09-25 10:25:17
西门吹雪170: 应助指数-1, 无应助 2016-09-26 22:49:55
Best of wishes and good luck.
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4楼2016-09-25 01:15:10
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