应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » DNA变性聚丙烯酰胺电泳问题 求助
121/2返回列表12下一页
查看: 2389  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

xincer

木虫 (小有名气)

[求助] DNA变性聚丙烯酰胺电泳问题 求助 已有5人参与

为什么我跑20%的变性PAGE胶，加DNA样本的时候都沉不到孔底，一直飘在上面。。
我用7M的尿素变性。，救助啊。

@biostar2009 @wizardfan @飞约疯人院 发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2016-09-24 11:33:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

ylma雁过无痕

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kuaile5420: 金币+2, 欢迎发帖交流 2016-09-24 21:23:34
变性PAGE胶上样之前，一般都会用200 uL的移液器吹打胶孔，将胶孔残留的尿素吹出来，然后再上样。上样用的loading buffer一般用的是6X非变性PAGE胶所用的buffer加到饱和尿素溶液中，后续按照4Xbuffer来配制DNA上样溶液
赞一下(1人) 回复此楼
平静地度过每个钻研学术的日子
2楼2016-09-24 16:48:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

坤啊兽

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
主要就是冲洗加样孔，尿素沉积很快的，而且预电泳中冲洗2-3次，加样中也要边冲洗边加样
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2016-09-26 11:24:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

xincer

木虫 (小有名气)
xn8008: 欢迎发帖交流 2016-09-25 10:25:10
引用回帖:
2楼: Originally posted by ylma雁过无痕 at 2016-09-24 16:48:18
变性PAGE胶上样之前，一般都会用200 uL的移液器吹打胶孔，将胶孔残留的尿素吹出来，然后再上样。上样用的loading buffer一般用的是6X非变性PAGE胶所用的buffer加到饱和尿素溶液中，后续按照4Xbuffer来配制DNA上样溶 ...

谢谢。也就是说上样前先将6*buffer用饱和尿素溶液稀释到4*吗？

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
3楼2016-09-25 00:15:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuy111

银虫 (正式写手)
感谢参与，应助指数 +1
xn8008: 欢迎发帖交流 2016-09-25 10:25:17
西门吹雪170: 应助指数-1, 无应助 2016-09-26 22:49:55
Best of wishes and good luck.
赞一下 回复此楼
4楼2016-09-25 01:15:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xincer

木虫 (小有名气)
xn8008: 欢迎发帖交流 2016-09-25 10:25:21
引用回帖:
4楼: Originally posted by yuy111 at 2016-09-25 01:15:10
Best of wishes and good luck.

Thanks

发自小木虫Android客户端
回复此楼
5楼2016-09-25 09:04:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lxzk

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-09-25 22:29:13
按二楼所说用移液器或者注射器冲洗上样孔，另外上样buffer用98%去离子甲酰胺加10mMEDTA和适量染料，作为1x(直接溶解乙醇沉淀DNA)或者2xloading buffer使用。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
6楼2016-09-25 19:25:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liugs

禁虫 (正式写手)
感谢参与，应助指数 +1
本帖内容被屏蔽
8楼2016-09-26 11:39:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hongbaojiang

新虫 (正式写手)
loading buffer加多少？

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
9楼2016-09-26 14:55:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Swift1204

新虫 (小有名气)
是单链还是双链，加饱和尿素震荡加热再上样。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
10楼2016-09-26 18:00:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 xincer 的主题更新
121/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 提交了我也来说说感想 +9 fummck 2026-05-20 10/500 2026-05-21 14:17 by draco1987
[论文投稿] 投稿求助，期刊 +3 希冀，有书读 2026-05-20 4/200 2026-05-21 11:07 by 希冀，有书读
[基金申请] 评审有感 +15 popular289 2026-05-18 26/1300 2026-05-21 10:35 by 西葫芦炒鸡蛋
[基金申请] 今年审到国自然15份，谈谈感受 +21 国自然国社科中 2026-05-17 22/1100 2026-05-21 09:37 by 2000zf36392
[论文投稿] Sci. Bull. 悲剧经验 +7 jyang1999 2026-05-16 8/400 2026-05-21 08:50 by 能丫
[论文投稿] 投MDPI的三个期刊都被桌拒 +3 木虫研究牲 2026-05-17 4/200 2026-05-21 08:02 by bobvan
[文学芳草园] 献血感触 +7 呀呀好傻 2026-05-19 12/600 2026-05-21 07:08 by maolC
[考博] 云南大学材料与能源学院解琳课题组钙钛矿博士招生 +4 光伏爱好者 2026-05-17 6/300 2026-05-21 01:37 by 17520222914
[有机交流] 反应很差，大量原料没有反应 5+3 Mr.Zot 2026-05-19 8/400 2026-05-20 22:19 by Equinoxhua
[基金申请] 面上本子正文33页，违规吗？会被低分嘛？ +11 1234567wang 2026-05-17 13/650 2026-05-20 18:55 by tanfancy
[考博] 如果工作了想读博，可以边工作边读全日制嘛？ 30+3 铁达火车 2026-05-18 5/250 2026-05-20 09:33 by tfang
[有机交流] 如何实现卤原子转化 +3 BT20230424 2026-05-15 8/400 2026-05-20 09:32 by xtlilibin
[基金申请] 2026山东省优青 +3 luckinging 2026-05-14 4/200 2026-05-19 16:15 by 52wls
[考博] 找博士生导师 +6 小代想上岸 2026-05-15 7/350 2026-05-19 10:22 by free_fisher
[基金申请] 同样的基金本子，换个专家直接从C变A！ (金币-10) +3 国自然国社科中 2026-05-19 3/150 2026-05-19 08:50 by Equinoxhua
[考博] 2026博士还有哪些学校有名额 +7 小王求读研 2026-05-15 8/400 2026-05-19 08:27 by zhyzzh
[考博] 博士申请 +5 星…… 2026-05-18 6/300 2026-05-18 23:49 by 糊糊涂涂好
[硕博家园] 我在等一个没有答案的答案 +3 Love_MH 2026-05-17 3/150 2026-05-18 02:22 by 竹林孤影
[考博] 光量子物理方向 博士招生 1人（2026.09） +3 sandyworld 2026-05-15 4/200 2026-05-17 14:38 by sandyworld
[硕博家园] 申请博士 +3 呃?呃 2026-05-15 3/150 2026-05-16 11:01 by a4742549
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭