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sun小宏宏

铜虫 (著名写手)

你用的试剂盒是不是专门提土壤DNA的 另外一个看你电泳时操作有没有错误 有一次我把电泳槽的两极放反了就什么的没有

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11楼2016-09-24 08:33:46
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梦想天行

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by 小红帽很开心 at 2016-09-21 06:09:13
取浸提液在平板上涂布,根据需要的菌选择合适的培养基,真菌选择培养真菌的培养基,细菌选择培养细菌的培养基,涂布了可以在划线分离开得到单一菌的富集菌落,分别提取DNA
...

富集后再提取,根据目的吧,细菌LB培养基!

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12楼2016-09-24 10:20:46
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wangzi4eve

新虫 (小有名气)

marker都有问题说明你配的胶或电泳液有问题,有的时候没跑出电泳来不一定没提出来,你可以直接做pcr试试,只要很少量的模板就能p目的条带。如果不是电泳的问题,那就从提取方面找原因,是不是菌加的不够,看看哪步出问题了

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13楼2016-09-24 15:13:20
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陈皮柚糖

新虫 (小有名气)

引用回帖:
12楼: Originally posted by 梦想天行 at 2016-09-24 10:20:46
富集后再提取,根据目的吧,细菌LB培养基!
...

谢谢

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14楼2016-09-25 01:00:44
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孔名卓

禁虫 (正式写手)

本帖内容被屏蔽

15楼2016-10-01 02:21:51
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liugs

禁虫 (正式写手)

本帖内容被屏蔽

16楼2016-11-02 09:38:50
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charon1982

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

什么富集再提,都是瞎扯,富集了还是你要的总DNA样本吗,除非你只是研究某类群的菌
考虑一下试剂盒是不是有问题,换手工提。
帮助虫友,提升自己
17楼2016-11-02 14:43:23
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21066337

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我估计是试剂盒的问题,我这提取土壤的DNA试验了很多次,每次都成功,试剂盒要用那种提取土壤、粪便专用的,贵是贵点,但是效果好很多。我提出来的土壤总DNA的效果很好,跑胶的亮度和MAKER差不多,条带很清楚明亮,后续高通量测序完全没问题。
18楼2016-11-02 14:55:16
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大头妞妞

新虫 (小有名气)

引用回帖:
18楼: Originally posted by 21066337 at 2016-11-02 14:55:16
我估计是试剂盒的问题,我这提取土壤的DNA试验了很多次,每次都成功,试剂盒要用那种提取土壤、粪便专用的,贵是贵点,但是效果好很多。我提出来的土壤总DNA的效果很好,跑胶的亮度和MAKER差不多,条带很清楚明亮, ...

你好,我最近也是在做提土壤DNA的,有一些问题想请教你,可以方便加你QQ吗

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19楼2016-12-26 00:11:31
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小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

你都已经说了,连marker都不清楚,那可能就是你的胶或者电泳条件有问题,再加上提取的纯度和浓度不够,自然就跑不出来了
···
20楼2016-12-26 08:56:52
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