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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 提取土壤微生物DNA
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sun小宏宏

铜虫 (著名写手)
你用的试剂盒是不是专门提土壤DNA的 另外一个看你电泳时操作有没有错误 有一次我把电泳槽的两极放反了就什么的没有

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11楼2016-09-24 08:33:46
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梦想天行

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by 小红帽很开心 at 2016-09-21 06:09:13
取浸提液在平板上涂布，根据需要的菌选择合适的培养基，真菌选择培养真菌的培养基，细菌选择培养细菌的培养基，涂布了可以在划线分离开得到单一菌的富集菌落，分别提取DNA
...

富集后再提取，根据目的吧，细菌LB培养基！

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12楼2016-09-24 10:20:46
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wangzi4eve

新虫 (小有名气)
marker都有问题说明你配的胶或电泳液有问题，有的时候没跑出电泳来不一定没提出来，你可以直接做pcr试试，只要很少量的模板就能p目的条带。如果不是电泳的问题，那就从提取方面找原因，是不是菌加的不够，看看哪步出问题了

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13楼2016-09-24 15:13:20
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陈皮柚糖

新虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by 梦想天行 at 2016-09-24 10:20:46
富集后再提取，根据目的吧，细菌LB培养基！
...

谢谢

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14楼2016-09-25 01:00:44
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孔名卓

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
15楼2016-10-01 02:21:51
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liugs

禁虫 (正式写手)
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16楼2016-11-02 09:38:50
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charon1982

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

什么富集再提，都是瞎扯，富集了还是你要的总DNA样本吗，除非你只是研究某类群的菌
考虑一下试剂盒是不是有问题，换手工提。
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帮助虫友，提升自己
17楼2016-11-02 14:43:23
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21066337

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我估计是试剂盒的问题，我这提取土壤的DNA试验了很多次，每次都成功，试剂盒要用那种提取土壤、粪便专用的，贵是贵点，但是效果好很多。我提出来的土壤总DNA的效果很好，跑胶的亮度和MAKER差不多，条带很清楚明亮，后续高通量测序完全没问题。
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18楼2016-11-02 14:55:16
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大头妞妞

新虫 (小有名气)
引用回帖:
18楼: Originally posted by 21066337 at 2016-11-02 14:55:16
我估计是试剂盒的问题，我这提取土壤的DNA试验了很多次，每次都成功，试剂盒要用那种提取土壤、粪便专用的，贵是贵点，但是效果好很多。我提出来的土壤总DNA的效果很好，跑胶的亮度和MAKER差不多，条带很清楚明亮， ...

你好，我最近也是在做提土壤DNA的，有一些问题想请教你，可以方便加你QQ吗

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19楼2016-12-26 00:11:31
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小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

你都已经说了，连marker都不清楚，那可能就是你的胶或者电泳条件有问题，再加上提取的纯度和浓度不够，自然就跑不出来了
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···
20楼2016-12-26 08:56:52
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