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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物信息 » miRNA实时荧光定量PCR内参基因U6序列如何获得？
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Johnab

新虫 (初入文坛)
你可以问下天根公司，他们有专业的试剂盒，从提取到检测，U6的序列种属间有差异，至于能不能用，最好参考下文献。

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11楼2016-11-17 22:24:31
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i19870503

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by pf790352975 at 2016-09-22 22:22:43
植物不懂 ，U6都是现成的内参啊   你怎么只有72miRNA  这也太少了吧

物种不同数据库注释差异很大，别拿小鼠和人说

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12楼2016-11-17 23:45:42
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定定117

新虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 央宗兰泽 at 2016-09-20 09:31:44
U6序列可以从文献或者网上百度到

亲，你有U6的序列吗，能否发一份给我

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13楼2017-03-13 23:14:56
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yuebanwan7

新虫 (初入文坛)
我测序才51个已知miRNA

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14楼2017-04-16 22:34:39
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yuebanwan7

新虫 (初入文坛)
U6和5.8sRNA是用的比较多的内参，我用DNAMAN测的两个Tm值相差5℃。U6是59.8℃，5.8sRNA是64.6℃。看你的试剂盒下游引物退火温度是多少，选择适当的内参吧。我是这么打算的，我也才开始做

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15楼2017-04-16 22:38:16
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choujiaoqi

铁杆木虫 (知名作家)
理论上 文献会给出序列

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16楼2017-04-17 01:03:19
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