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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 色谱图相关的问题
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小扁头

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
首先看下你这个色谱峰的峰纯度是否真的有杂志包在里面，建议降低浓度更容易看清，其次你的分离梯度是否有问题，在这个主峰出峰时间的流动相比例大概是多少？可以试着在这附近调节流动想比例，一般是能分开的。

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11楼2016-09-04 20:51:31
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跳跳糖521

新虫 (正式写手)
引用回帖:
11楼: Originally posted by 小扁头 at 2016-09-04 20:51:31
首先看下你这个色谱峰的峰纯度是否真的有杂志包在里面，建议降低浓度更容易看清，其次你的分离梯度是否有问题，在这个主峰出峰时间的流动相比例大概是多少？可以试着在这附近调节流动想比例，一般是能分开的。
...

谢谢您的回复，这个主峰出峰时间的梯度我有用等度，梯度走但是是没有分开，后来我换了一下波长，改变了一下流动相中酸的比例，在相应的地方仍然感觉还有杂质包裹在内，后来渐渐地从中分出了一两个小峰，但里面还藏有有一个刚刚露头的尖峰，我就怎么也分不开了。我想请教的是哪儿的峰会不会是同分异构体？还有一个问题想请教您，不知您是否方便回答，是关于SPE小柱的问题，最近我查一篇英文文献上面使用的是waters家的sep pak C18小柱，使用乙腈和乙酸乙酯按1；1的比例洗脱的，可是我个人认为，乙酸乙酯用于反相色谱柱有点不合适，不知您是否遇到过类似的情况，还望指教。谢谢
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12楼2016-09-05 10:50:40
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跳跳糖521

新虫 (正式写手)
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10楼: Originally posted by 烟雨烟 at 2016-09-04 20:34:33
你这个梯度设置是你自己想的，还是文献给的？？梯度变化太多了吧。我倒建议你一个简单的梯度分离方法：0.1%甲酸甲醇:0-50min：10%升到50%。50-80min：50%

这个是我自己摸索的，因为我这个是水提取的，有参考过文献但走出来的效果不是很好，我就自己大概设了一个0-100%范围内的梯度，然后在这个基础上摸索的，在摸索的过程中还遇到一个问题就是基线不稳，使用过纯水，0,1%的甲酸水，0.05%的甲酸水，0,1%的甲酸水+0,1%的甲酸甲醇溶液，都会出现基线不稳，
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13楼2016-09-05 11:01:07
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小_东西

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
这个是分离度不行，可以换根柱子试试，然后流速调低一点，这样也可以分离好一点！
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14楼2016-09-05 11:42:30
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nvle

铜虫 (小有名气)
★
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换换梯度，不行的话可以换流动相试试，乙睛洗脱能力比甲醇好

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15楼2016-09-05 13:02:08
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小扁头

新虫 (初入文坛)
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12楼: Originally posted by 跳跳糖521 at 2016-09-05 10:50:40
谢谢您的回复，这个主峰出峰时间的梯度我有用等度，梯度走但是是没有分开，后来我换了一下波长，改变了一下流动相中酸的比例，在相应的地方仍然感觉还有杂质包裹在内，后来渐渐地从中分出了一两个小峰，但里面还藏 ...

你这个是中药水提取物质？就是说你的分离对象包含了很多，而你不知道这里面的东西是什么结构，这样分离化合物是不是有点盲目了，要确定是否是同分异构体可以看下这个峰的紫外吸收是否一致，若为手性异构体普通柱子是无法实现分离的。

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16楼2016-09-05 21:42:45
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跳跳糖521

新虫 (正式写手)
我们走的是指纹图谱～确实不知道里面到底有哪些物质～

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17楼2016-09-05 21:49:02
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ToproCN

捐助贵宾 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
出现色谱峰无法分开时，考虑：
1.低流速低柱温有利于分离，能够提高分离度和降低半峰宽，但是出峰时间也就是保留时间会推迟
2.流动相配法个人感觉不推荐。应该纯有机相和水相分开，即甲醇一个储液瓶其他的一个储液瓶
3.流动相比例。将包含该出峰时间段的流动相配比改一改。至于该多少和怎么改应该根据你的色谱柱类型和被分离物质的性质有关
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根据相关法律法规与规定，该结果未允与显示
18楼2016-09-06 11:54:22
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ancne123

铁杆木虫 (著名写手)
分离度不行

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19楼2016-09-07 07:21:08
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412432058

新虫 (小有名气)
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13楼: Originally posted by 跳跳糖521 at 2016-09-05 11:01:07
这个是我自己摸索的，因为我这个是水提取的，有参考过文献但走出来的效果不是很好，我就自己大概设了一个0-100%范围内的梯度，然后在这个基础上摸索的，在摸索的过程中还遇到一个问题就是基线不稳，使用过纯水，0, ...

这么复杂的梯度，基线不会太稳，肯定有飘

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20楼2016-09-07 08:02:37
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