| 查看: 875 | 回复: 5 | |||
| 当前主题已经存档。 | |||
lzhwin木虫 (正式写手)
|
[交流]
求助：western转膜的问题
|
||
|
这两天在做western，连续转了3次膜立春红S染色，结果什么都没有，太让人伤心了。 具体细节： 植物叶片总蛋白提取，目的蛋白约70KD 浓缩胶5% 分离胶8%。上样跑两块胶其中一块做了考马斯亮蓝染色有明显条带。 PVDF膜先用甲醇处理约5秒，然后放入转膜缓冲液（甘氨酸、Tris、甲醇）中浸泡，叠放顺序均润湿过，黑板、海绵、两张滤纸、凝胶、膜、PVDF膜、两张滤纸、海绵、白板。biorad湿转，插入是黑板对应黑板，200mA恒流1小时，取出立春红S染色5分钟，整个膜变成红色，什么条带都没有。 PVDF膜是不是有反正面啊？感觉一面亲水一面疏水啊。 肯定是关键步骤出了问题，否则不可能一点条带都没有。大家帮帮忙吧！ |
回复此楼» 猜你喜欢
285求调剂
已经有5人回复
-
289求调剂
已经有7人回复
-
求调剂
已经有4人回复
-
【求调剂】085601材料工程专硕 | 总分272 |
已经有4人回复
-
286求调剂
已经有8人回复
-
083000学硕274求调剂
已经有3人回复
-
085701环境工程求调剂
已经有4人回复
-
070300求调剂306分
已经有3人回复
-
266求调剂
已经有12人回复
-
化学调剂
已经有5人回复
2楼2008-11-21 15:20:09
lzhwin
木虫 (正式写手)
- 应助: 9 (幼儿园)
- 金币: 1977.1
- 散金: 3
- 红花: 2
- 帖子: 489
- 在线: 58.1小时
- 虫号: 481076
- 注册: 2007-12-17
- 性别: GG
- 专业: 植物生理与生化
3楼2008-11-23 11:11:36
三磷酸腺苷
铁杆木虫 (职业作家)
- BioEPI: 3
- 应助: 1 (幼儿园)
- 贵宾: 0.021
- 金币: 7298.5
- 散金: 9
- 红花: 13
- 帖子: 4032
- 在线: 224.7小时
- 虫号: 551611
- 注册: 2008-04-27
- 性别: GG
- 专业: 神经系统肿瘤（含特殊感受
4楼2008-11-23 11:40:12
三磷酸腺苷
铁杆木虫 (职业作家)
- BioEPI: 3
- 应助: 1 (幼儿园)
- 贵宾: 0.021
- 金币: 7298.5
- 散金: 9
- 红花: 13
- 帖子: 4032
- 在线: 224.7小时
- 虫号: 551611
- 注册: 2008-04-27
- 性别: GG
- 专业: 神经系统肿瘤（含特殊感受
5楼2008-11-23 11:40:31
lzhwin
木虫 (正式写手)
- 应助: 9 (幼儿园)
- 金币: 1977.1
- 散金: 3
- 红花: 2
- 帖子: 489
- 在线: 58.1小时
- 虫号: 481076
- 注册: 2007-12-17
- 性别: GG
- 专业: 植物生理与生化
6楼2008-11-24 14:05:46
20