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菱格ing

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于DNA降解 已有4人参与

我从土壤中提取出来的DNA总是降解,也尝试更换了BUFFER,但是效果不好,而且降解的速度在常温下很快,20kb的片段两个小时就全部降解到只有500bp左右,请问有可能是什么原因造成的呢?土壤长时间常温放置会不会有影响。求大神解答。
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冰尘子

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
菱格ing: 金币+2, ★★★很有帮助 2016-09-09 15:23:01
你是用手提的方法?提的纯度怎么样,土壤中有大量的杂质,如腐殖酸之类的。如果你的土壤中微生物较为丰富,提取的DNA浓度较高,建议你用饱和酚多洗一次,酚-氯仿再多抽提2次。如果提的DNA浓度不高建议你换方法或者用试剂盒。
走好人生路
9楼2016-09-08 11:24:48
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菱格ing

新虫 (初入文坛)

土壤样品放置的时间比较长  所以换了新土   
各种需要使用的溶液都已经灭菌了
2楼2016-08-31 17:49:13
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千与千寻1

新虫 (正式写手)

正在寻找方向中
3楼2016-08-31 19:31:27
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菱格ing

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 千与千寻1 at 2016-08-31 19:31:27
那就尽量低温试试呗

多谢回复,低温只能减慢降解的速度,但是不会抑制降解,而且我在做后续反应时是不能保证低温的。
4楼2016-09-02 10:01:07
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