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Yuanfang_818金虫 (小有名气)
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求助，双酶切 已有4人参与
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各位道友，我将2000bp的片段插入到pET-32a中，然后双酶切，电泳只有4000和7000之间，有一条带，估计是32a的5900大小，没有2000的目的条带。怎么回事？我验证过质粒，电泳在5000多，准备跑PCR再验证一下。问题只有质粒吗，还有没有别的原因啊。求教！ 发自小木虫Android客户端 |
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2楼2016-08-30 16:03:13
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xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-09-01 08:26:42
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-09-01 08:26:42
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第一，提取的质粒，我重新跑PCR，有目的片段，说明片段连进去了，质粒没问题。第二，我觉得质粒没有切开，因为之前我提取的质粒，跑电泳，片段也在5000多，我估计和32a的5900差不多，电泳区分不开。第三，我的酶切体系是50微升的，两种酶各加了1和2微升，质粒共加了1500ng，酶切了5个小时。 发自小木虫Android客户端 |
3楼2016-08-30 21:14:13
4楼2016-08-30 23:59:58
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