24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
查看: 2744  |  回复: 9
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

寒冰利剑

金虫 (小有名气)

[交流] 启动子PCR

本人最近在克隆一个大小约2600bp的启动子,用的是NEB公司的phusion超保真酶,模板之前经过分段测序,有完整的序列,现在设计克隆全长启动子序列,测序发现中间部分序列存在较大程度与模板不匹配现象,启动子序列GC%平均在30%-40%,用phusion酶中的GC buffer,引物保证没有问题,不知道这是什么原因引起的,不知有没有虫友遇到过这种事情。有没有解决这种问题的方法,(到提供实用建议的,可追加金币,非诚勿扰)

发自小木虫Android客户端
回复此楼
岂能尽如人意,但求无愧我心。
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1141209419

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
1楼: Originally posted by 寒冰利剑 at 2016-08-21 00:12:20
本人最近在克隆一个大小约2600bp的启动子,用的是NEB公司的phusion超保真酶,模板之前经过分段测序,有完整的序列,现在设计克隆全长启动子序列,测序发现中间部分序列存在较大程度与模板不匹配现象,启动子序列GC% ...

请问您是用什么方法克隆的启动子

发自小木虫Android客户端
10楼2018-11-29 10:51:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 寒冰利剑 的主题更新
普通表情 高级回复(可上传附件)
信息提示
请填处理意见