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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 求问表达感受态BL21DE3可否提取质粒呢？
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想学好的学渣

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 1992xlliu at 2016-08-11 11:35:13
可以提质粒的，只是质粒的得率会比克隆菌低。不会有其它质粒污染，DE3是溶原片段，在基因组上。

嗯嗯，好的，谢谢您

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11楼2016-08-11 12:11:12
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siriusxuan

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
不会有其他质粒污染，但是提出来的质粒纯度可能会受影响，浓度也会变低一些，此外，时间久了会丢失质粒，不能用于长期保存。
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此座可言轻社稷，江山万里起风尘。
12楼2016-08-11 14:26:50
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vanchy

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
可以提取，只是提取效率会低一些，而且要加入蛋白酶
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13楼2016-08-11 14:39:26
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原海亮

木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
可以的，浓度对于保存质粒来讲够用的。当然有的人会注意到，一些质粒会被甲基化等一些修饰，特别一些酶切位点，所以菌内保存质粒一般选择背景更安全的克隆宿主。

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天空才是极限，我有信心飞的更高！
14楼2016-08-11 19:31:15
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swgcpy

至尊木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
提质粒最好还是用top10，扩增专用
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15楼2016-08-11 20:24:51
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想学好的学渣

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
15楼: Originally posted by swgcpy at 2016-08-11 20:24:51
提质粒最好还是用top10，扩增专用

嗯嗯，谢谢

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16楼2016-08-11 21:04:18
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想学好的学渣

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
14楼: Originally posted by 原海亮 at 2016-08-11 19:31:15
可以的，浓度对于保存质粒来讲够用的。当然有的人会注意到，一些质粒会被甲基化等一些修饰，特别一些酶切位点，所以菌内保存质粒一般选择背景更安全的克隆宿主。

谢谢了，我准备先提出来，然后再转化克隆用的感受态，再提一次

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17楼2016-08-11 21:05:01
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korchagin

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
当然可以啊，但建议提取之后转移到适合保存质粒的菌株里
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18楼2016-08-12 15:08:11
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514278815

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
质粒浓度不高，你提取后可以再转化高拷贝的菌株DH5a或者TG1再提取会高很多人

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19楼2016-08-12 19:17:55
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想学好的学渣

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
19楼: Originally posted by 514278815 at 2016-08-12 19:17:55
质粒浓度不高，你提取后可以再转化高拷贝的菌株DH5a或者TG1再提取会高很多人

三克油啦

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20楼2016-08-12 19:25:04
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