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想学好的学渣

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
10楼: Originally posted by 1992xlliu at 2016-08-11 11:35:13
可以提质粒的,只是质粒的得率会比克隆菌低。不会有其它质粒污染,DE3是溶原片段,在基因组上。

嗯嗯,好的,谢谢您

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11楼2016-08-11 12:11:12
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siriusxuan

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
不会有其他质粒污染,但是提出来的质粒纯度可能会受影响,浓度也会变低一些,此外,时间久了会丢失质粒,不能用于长期保存。
此座可言轻社稷,江山万里起风尘。
12楼2016-08-11 14:26:50
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vanchy

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可以提取,只是提取效率会低一些,而且要加入蛋白酶
13楼2016-08-11 14:39:26
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原海亮

木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可以的,浓度对于保存质粒来讲够用的。当然有的人会注意到,一些质粒会被甲基化等一些修饰,特别一些酶切位点,所以菌内保存质粒一般选择背景更安全的克隆宿主。

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天空才是极限,我有信心飞的更高!
14楼2016-08-11 19:31:15
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swgcpy

至尊木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
提质粒最好还是用top10,扩增专用
15楼2016-08-11 20:24:51
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想学好的学渣

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
15楼: Originally posted by swgcpy at 2016-08-11 20:24:51
提质粒最好还是用top10,扩增专用

嗯嗯,谢谢

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16楼2016-08-11 21:04:18
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想学好的学渣

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
14楼: Originally posted by 原海亮 at 2016-08-11 19:31:15
可以的,浓度对于保存质粒来讲够用的。当然有的人会注意到,一些质粒会被甲基化等一些修饰,特别一些酶切位点,所以菌内保存质粒一般选择背景更安全的克隆宿主。

谢谢了,我准备先提出来,然后再转化克隆用的感受态,再提一次

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17楼2016-08-11 21:05:01
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korchagin

木虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
当然可以啊,但建议提取之后转移到适合保存质粒的菌株里
18楼2016-08-12 15:08:11
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514278815

木虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
质粒浓度不高,你提取后可以再转化高拷贝的菌株DH5a或者TG1再提取会高很多人

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19楼2016-08-12 19:17:55
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想学好的学渣

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
19楼: Originally posted by 514278815 at 2016-08-12 19:17:55
质粒浓度不高,你提取后可以再转化高拷贝的菌株DH5a或者TG1再提取会高很多人

三克油啦

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20楼2016-08-12 19:25:04
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