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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 求助大神帮忙看看，pcr后出现两条带。
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暗星

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
814257155: 金币+30, ★★★很有帮助 2016-08-04 10:41:52
下面的条带可能是引物二聚体，还有回收后没有必要再扩了，你可以第一次多扩几管，然后用一个柱子回收，最后在少加一些水溶解，这样回收的浓度够你酶切或连接测序了！
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11楼2016-08-01 17:37:15
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masterboyama

铁虫 (著名写手)
提高下温度，切胶回收就可以了

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12楼2016-08-01 21:46:00
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lanhaizhixin

木虫 (著名写手)
大小140bp吧,不是140kb.差1000倍呢。

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13楼2016-08-02 07:27:38
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njuzhangxin

铁杆木虫 (小有名气)
下面这么亮显然不是引物二聚体，还是引物特异性不好，重新设计引物

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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

814257155
14楼2016-08-03 03:40:42
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814257155

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
14楼: Originally posted by njuzhangxin at 2016-08-03 03:40:42
下面这么亮显然不是引物二聚体，还是引物特异性不好，重新设计引物

引物是用的通用引物，看的文献上几乎都用的这个引物，如果是引物二聚体的话，亮度不高是吗？。

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15楼2016-08-03 07:23:48
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王二妮good

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
建议把marker也放上来看看～不排除引物不好的可能

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越努力越幸运~
16楼2016-08-03 09:06:39
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damaoouba

木虫 (正式写手)
不需要纠结这是什么啦，不影响你后续做的。应该是杂带或者引物而具体吧，我更倾向于这是杂带。一般是因为引物特异性不够导致的。

后续做的话，把目的条带切胶回收。用回收产物做底物，重新PCR，就行了。
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17楼2016-08-05 09:31:31
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814257155

新虫 (初入文坛)
好的，谢谢了，我按照你说的试试。

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18楼2016-08-05 10:54:31
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814257155

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
18楼: Originally posted by 814257155 at 2016-08-05 10:54:31
好的，谢谢了，我按照你说的试试。

谢谢你了，这是我回收后的跑胶图。

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19楼2016-08-08 10:08:28
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814257155

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
19楼: Originally posted by 814257155 at 2016-08-08 10:08:28
谢谢你了，这是我回收后的跑胶图。
...

附上
求助大神帮忙看看，pcr后出现两条带。



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20楼2016-08-08 10:09:23
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