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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 为啥总反反复复PCR总是扩不出目的条带
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一起来旅行

银虫 (正式写手)

[求助] 为啥总反反复复PCR总是扩不出目的条带 已有1人参与

刚来的引物第一次摸剃度的时候条带可亮了，但是后来一直重复怎么也扩不出来目的条带，反而引物二聚体特别的亮。然后又重新总trizol提RNA，浓度1000ng/ul，A260/280为1.79,A230/260为0.9，然后逆转录后浓度4000多ng/ul,然后还是按之前的程序跑PCR,结果仍然没有目的条带，表示心很累啊，求大神指导

@biostar2009 @飞约疯人院 @wizardfan @youlinglyw 发自小木虫Android客户端
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1楼 2016-07-23 23:57:11
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Bioexperixgs

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
做个剃度试一下呗。Tm为引物退火温度加减5度

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9楼2016-07-25 22:21:12
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pangadmire

铁虫 (小有名气)
请问你逆转录后浓度怎么测的？

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2楼2016-07-24 00:44:58
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一起来旅行

银虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by pangadmire at 2016-07-24 00:44:58
请问你逆转录后浓度怎么测的？

我们实验室有测浓度的仪器

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3楼2016-07-24 09:12:46
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pangadmire

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 一起来旅行 at 2016-07-24 09:12:46
我们实验室有测浓度的仪器
...

nanodrop?用这个测的？

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4楼2016-07-24 14:46:36
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