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遗丶失

铜虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by 1163475954 at 2016-07-15 13:04:04
第2,7两条泳道里有东西,我觉得是基因组DNA但按理说也不会形成这样的拖尾,这拖尾是怎么形成的,有什么办法将他去掉吗?
...

2,7两道也可能是浓度太高了的问题,猜测

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11楼2016-07-18 01:43:15
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朱庆平

铜虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
那些弥撒的条带不就是mRNA吗?不过你提的RNA三条带的比例好像不太对。

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12楼2016-07-18 08:35:06
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不爱做实验

银虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by 1163475954 at 2016-07-15 13:04:04
第2,7两条泳道里有东西,我觉得是基因组DNA但按理说也不会形成这样的拖尾,这拖尾是怎么形成的,有什么办法将他去掉吗?
...

个人很久没提取RNA了,感觉自己会的那点技艺都消失了。
记得是存在DNA的原因,以及RNA发生了降解。
所以DEPC处理很重要,包括实验中以及电泳槽电泳缓冲液要现用现配等。
另外,记得加入RNA酶抑制剂。一般按照提取流程不会有太大问题的。
不过看你这个已经很不错了,因为RNA很容易被降解或者电泳条带很弱
13楼2016-07-18 10:01:42
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erliujian

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
第二,第七,DNA没除干净,再加点酶就行了。另外,5S端太亮,说明降解的比较厉害
14楼2016-07-18 11:57:33
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Eternity宇

禁虫 (著名写手)

本帖内容被屏蔽

15楼2016-07-18 12:04:05
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1163475954

新虫 (小有名气)

引用回帖:
11楼: Originally posted by 遗丶失 at 2016-07-18 01:43:15
2,7两道也可能是浓度太高了的问题,猜测
...

对呀,加了80ul的水,还将近2000,可能里面有DNA吧

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真正学一点东西
16楼2016-07-18 22:39:58
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遗丶失

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
16楼: Originally posted by 1163475954 at 2016-07-18 22:39:58
对呀,加了80ul的水,还将近2000,可能里面有DNA吧
...

嗯,rna浓度太大时电泳会出现类似降解的拖带,至于dna残留应该是提取过程中的细节问题及试剂问题,不过看起来量不是非常大,如果只是做普通的RT-pcr问题应该不大

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17楼2016-07-19 01:02:40
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遗丶失

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
16楼: Originally posted by 1163475954 at 2016-07-18 22:39:58
对呀,加了80ul的水,还将近2000,可能里面有DNA吧
...

浓度太大有一种可能性需要注意就是加处理水后溶解未完全,如果做定量需要注意下

发自小木虫Android客户端
18楼2016-07-19 01:04:37
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