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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » RNA提取
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遗丶失

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by 1163475954 at 2016-07-15 13:04:04
第2,7两条泳道里有东西，我觉得是基因组DNA但按理说也不会形成这样的拖尾，这拖尾是怎么形成的，有什么办法将他去掉吗？
...

2，7两道也可能是浓度太高了的问题，猜测

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11楼2016-07-18 01:43:15
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朱庆平

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
那些弥撒的条带不就是mRNA吗？不过你提的RNA三条带的比例好像不太对。

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12楼2016-07-18 08:35:06
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不爱做实验

银虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by 1163475954 at 2016-07-15 13:04:04
第2,7两条泳道里有东西，我觉得是基因组DNA但按理说也不会形成这样的拖尾，这拖尾是怎么形成的，有什么办法将他去掉吗？
...

个人很久没提取RNA了，感觉自己会的那点技艺都消失了。
记得是存在DNA的原因，以及RNA发生了降解。
所以DEPC处理很重要，包括实验中以及电泳槽电泳缓冲液要现用现配等。
另外，记得加入RNA酶抑制剂。一般按照提取流程不会有太大问题的。
不过看你这个已经很不错了，因为RNA很容易被降解或者电泳条带很弱
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13楼2016-07-18 10:01:42
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erliujian

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
第二，第七，DNA没除干净，再加点酶就行了。另外，5S端太亮，说明降解的比较厉害
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14楼2016-07-18 11:57:33
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Eternity宇

禁虫 (著名写手)
本帖内容被屏蔽
15楼2016-07-18 12:04:05
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1163475954

新虫 (小有名气)
引用回帖:
11楼: Originally posted by 遗丶失 at 2016-07-18 01:43:15
2，7两道也可能是浓度太高了的问题，猜测
...

对呀，加了80ul的水，还将近2000，可能里面有DNA吧

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真正学一点东西
16楼2016-07-18 22:39:58
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遗丶失

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
16楼: Originally posted by 1163475954 at 2016-07-18 22:39:58
对呀，加了80ul的水，还将近2000，可能里面有DNA吧
...

嗯，rna浓度太大时电泳会出现类似降解的拖带，至于dna残留应该是提取过程中的细节问题及试剂问题，不过看起来量不是非常大，如果只是做普通的RT-pcr问题应该不大

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17楼2016-07-19 01:02:40
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遗丶失

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
16楼: Originally posted by 1163475954 at 2016-07-18 22:39:58
对呀，加了80ul的水，还将近2000，可能里面有DNA吧
...

浓度太大有一种可能性需要注意就是加处理水后溶解未完全，如果做定量需要注意下

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18楼2016-07-19 01:04:37
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