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neaushuai

木虫 (正式写手)

秦砖汉瓦

引用回帖:
9楼: Originally posted by shjsyl at 2016-07-07 21:20:02
有DNA酶污染,导致PCR产物弥散,注意水和PCR管的灭菌

用的是mix 水和pcr管均灭菌 是否模板与引物的比例1:5过大?

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为天地立心,为生民立命,为往圣继绝学,为万世开太平
21楼2016-07-09 22:13:21
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neaushuai

木虫 (正式写手)

秦砖汉瓦

内容已删除
为天地立心,为生民立命,为往圣继绝学,为万世开太平
22楼2016-07-09 22:15:04
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zyn19931211

新虫 (初入文坛)

我也是这种情况,前几天还没问题呢,这几天就一片灰, 最近气温特别高,是模版降解了么?还是体系设计的不行啊?

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23楼2016-07-11 20:11:34
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flhua

木虫 (正式写手)

bachelordom

【答案】应助回帖

不特异,退火温度在提高一点试试吧
只要有梦想,坚持就一定能实现
24楼2016-07-12 12:31:20
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neaushuai

木虫 (正式写手)

秦砖汉瓦

引用回帖:
24楼: Originally posted by flhua at 2016-07-12 12:31:20
不特异,退火温度在提高一点试试吧

好 我试试

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为天地立心,为生民立命,为往圣继绝学,为万世开太平
25楼2016-07-12 23:11:39
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neaushuai

木虫 (正式写手)

秦砖汉瓦

引用回帖:
23楼: Originally posted by zyn19931211 at 2016-07-11 20:11:34
我也是这种情况,前几天还没问题呢,这几天就一片灰, 最近气温特别高,是模版降解了么?还是体系设计的不行啊?

已解决,引物特异性差。调整后就可以了。

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为天地立心,为生民立命,为往圣继绝学,为万世开太平
26楼2016-07-12 23:13:10
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zyn19931211

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
26楼: Originally posted by neaushuai at 2016-07-12 23:13:10
已解决,引物特异性差。调整后就可以了。
...

换引物了啊?

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27楼2016-07-13 08:34:29
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长相思

银虫 (小有名气)

未来很美好
28楼2016-07-13 09:18:15
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NgAgo

新虫 (小有名气)

你确定是重复之前的实验吗?各试剂用量一样?单从图片看,你的maker本来就跑得不好看,胶没融好,还有可能就是你直接用pcr产物直接扩增,这样的模板浓度太高,要稀释才行。

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29楼2016-07-13 09:44:53
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neaushuai

木虫 (正式写手)

秦砖汉瓦

引用回帖:
27楼: Originally posted by zyn19931211 at 2016-07-13 08:34:29
换引物了啊?
...

是的 引物调整了两个碱基

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为天地立心,为生民立命,为往圣继绝学,为万世开太平
30楼2016-07-13 18:48:51
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